Cromatografía en capa delgada

Serena Rodríguez Oldani

Módulo de Recuperación TPs Química Orgánica - UNGS Marzo 2022

DEMO           INTRODUCCIÓN A LA CROMATOGRAFÍA DE CAPA DELGADA

OBJETIVOS  

Comparar la movilidad de sustancias sobre la fase estacionaria utilizando distintas mezclas de solventes de elución.

INTRODUCCIÓN

La cromatografía en capa delgada (ccd) se basa en la preparación de una capa, uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, que puede ser de vidrio o aluminio u otro soporte. La fase móvil es líquida y la fase estacionaria consiste en un sólido. La mezcla a analizar se deposita a una distancia del borde inferior de la placa, luego se introduce en una cubeta que contenga la fase móvil, donde asciende por capilaridad a lo largo de la placa, desplazando los compuestos a distinta velocidad, donde se separan.

El desplazamiento de un eluato se cuantifica en términos de su Rf o factor de retardo, la relación entre la trayectoria recorrida por cada eluato entre la que ha recorrido el frente del disolvente. La cromatografía de capa delgada se ha empleado extensamente en química (donde cabe destacar la química de productos naturales), bioquímica, toxicología, ciencias ambientales, ciencias de los alimentos, etc.

DESARROLLO EXPERIMENTAL

El docente usó una muestra que consiste en una mezcla sólida equimolar de resorcina y difenilcarbazida. Disolvió una punta de espátula de la mezcla en 1mL de metanol. Luego, en 3 placas de sílica gel de 3cm de ancho por 5cm de alto, con un lápiz trazó la línea de siembra a cm de la base de la placa y con la ayuda de un capilar de punta fina sembró en cada una de las 3 placas: la solución (ya preparada), estándar de resorcina y estándar de difenilcarbazida. En 3 cubas diferentes preparó las siguientes mezclas de solvente: Hexano, Hexano:Acetato de etilo 1:1 y Acetato de etilo. Después colocó cuidadosamente una placa en cada cuba con ayuda de una pinza intentando que el solvente toque todo el borde de la placa en el mismo momento (Obs: el solvente de elución no debe superar la línea de siembra). Cuando el frente del solvente llegó al final de la placa, la retiró de la cuba con ayuda de la pinza y marcó el avance del solvente. Dejó secar, reveló la placa con luz ultravioleta y marcó la distancia a la cual se observaron manchas debidas a la movilidad de las sustancias. Con los datos obtenidos, pudimos determinar los Rf para cada una de las placas.

REGISTRO DE RESULTADOS EXPERIMENTALES

Datos:

• Composición de la muestra: mezcla de resorcina y difenilcarbazida.

• Fase estacionaria: Silica Gel (placas rectangulares)

• Fase móvil:

1. Hexano

2. Hexano: Acetato de etilo 1:1

3. Acetato de etilo

• Utilizamos luz UV para revelar el recorrido de las sustancias (ya que las placas que usamos poseen un indicador que emite fluorescencia en luz UV).

PLACAS LUEGO DEL REVELADO:[pic 1]

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RF DE CADA COMPONENTE DE LA MEZCLA PARA CADA EXPERIMENTO INDICANDO LA DISTANCIA RECORRIDA POR EL FRENTE DEL SOLVENTE Y LA DISTANCIA RECORRIDA POR LOS COMPONENTES

ANÁLISIS DE RESULTADOS

Podemos usar la polaridad de los compuestos a separar y las características de las fases estacionaria y móvil para ver si la elución va a ocurrir o no. Estructura de las muestras: [pic 24]

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