Cromatografía en columna.

Práctica No.7 Cromatografía En Columna[pic 1][pic 2]

García Martínez Erik (Clave 36)

Robles Lugo Fernando (Clave 45)

Grupo: 25 Laboratorio De Química Orgánica I

Profesor: Mendoza Pérez Jacinto Eduardo

Resumen

La cromatografía en columna es utilizada para separar y a la vez purificar compuestos orgánicos que presenten estado sólido o líquido; reteniendo en su fase estacionaria a algunos compuestos por su propiedad de adsorción; haciendo pasar una corriente de disolventes que arrastrará a los compuestos constituyentes de la mezcla, haciéndoles avanzar a través de la columna. Las fracciones menos polares, que son por lo general las que se retienen poco o nada en el adsorbente, serán las primeras en salir de la columna; en cambio, las sustancias más polares, quedan retenidas por más tiempo en el adsorbente Las muestras que tuvieron presencia del compuesto fueron la 1, 2, 3, 4, 5,6, en las cuales la que mayor intensidad de color presentaba mayor concentración tenía.

Antecedentes

En este tipo de cromatografía, la fase estacionaria utilizada, es decir, el absorbente, se coloca en el interior de una columna de vidrio, la cual finaliza con una llave para controlar el paso de sustancias al exterior de la columna. La fase estacionaria se impregna con el eluyente o fase móvil. Seguidamente la mezcla orgánica que nos interesa separar la depositamos por la parte superior de la fase estacionaria, y así la fase móvil podrá ir atravesando el sistema. Los compuestos que se encuentran disueltos en la fase móvil, poco a poco saldrán de la columna cromatográfica, y se recogen en fracciones. Las fracciones menos polares, que son por lo general las que se retienen poco o nada en el adsorbente, serán las primeras en salir de la columna. En cambio, las sustancias más polares, quedan retenidas por más tiempo en el adsorbente, y a menudo es necesario el uso de diferentes disolventes con la finalidad de incrementar su polaridad para que sean arrastradas por esto. El tiempo que se necesita para hacer fluir un compuesto por la columna, se conoce con el nombre de tiempo de retención. Para elegir el disolvente, primero se lleva a cabo una cromatografía en capa fina de la muestra a analizar. El disolvente debe producir una buena separación de los componentes de la mezcla en la placa, colocando el componente menos polar a un Rf cercano a 0.3. El adsorbente mayormente utilizado para las cromatografías en columna, es el gel de sílice. A veces se utilizan la alúmina o el florisil (silicato magnésico). Una de las mezclas de disolventes más utilizadas es hexano/acetato de etilo. Los factores que influyen en la separación son temperatura; a menor temperatura las sustancias se adsorben más en la fase, las corrientes de aire, la pureza de los disolventes, la polaridad del eluyente seleccionado, una sustancia polar se desplazará más fácilmente en un eluyente polar, masa de la muestra: Muestras de gran masa tardan más en ser purificadas.

Resultados

Anexos en las hojas de las cromatoplacas

0.0256 masa de ingrediente activo

Discusión de resultados

En esta práctica se realizó una cromatografía por columna; utilizando como muestra problema 50 mg de una pastilla sedalmerck, se recolectaron 8 fracciones (eluatos) de las cuales las primeras fracciones fueron menos polares, que son por lo general las que se retienen poco o nada en el adsorbente.

Después se realizó una cromatografía en capa fina capa fina para comprobar la pureza del compuesto que en este caso fue paracetamol para verificar la separación al realizar las cromatoplacas y así poder identificar los eluatos en donde hay presencia del compuesto separado. Las muestras 1, 2, 3, 4, 5,6 presentaron manchas al observarlas en una cámara de UV y en una cámara de yodo indicando que estas muestras eran las que contenían el compuesto. La mancha de la muestra 1 mostró una coloración más intensa y esto nos quiere decir que presenta mayor concentración del producto a diferencia de las demás muestras, las muestras 2 y 3 presentaron menor coloración a diferencia de la muestra 1, las muestras 4 y 5 presentaron menor intensidad de color ya que tenían menor concentración mientras que la muestra 6 apenas se observaba un pequeño punto, las muestras  7 y 8 no mostraron ninguna mancha debido a que no contenían  el compuesto activo.

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