Desnaturalización y precipitación de proteinas

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UNIVERSIDAD RICARDO PALMA

           FACULTAD DE CIENCIA BIOLÓGICAS

        ESCUELA DE MEDICINA VETERINARIA

Práctica n°: 02

Tema: DESNATURALIZACION Y PRECIPITACION DE PROTEINAS

Curso:  Bioquímica Animal

Profesor: Dra. Lidia luz Cruz Neyra

Integrantes:

• Rajo Pascual, Yadhira Nayely
• Fabrizzio Sebastian, Patiño Zamudio
• Rengifo Arcos, Carlos Adrian
• Espinoza Herrera, Sergio Matias

2023

• INTRODUCCIÓN:

Las proteínas, al igual que sus monómeros, los aminoácidos gozan de propiedades anfotéricas. En soluciones fuertemente ácidas se cargan positivamente, migrando hacia el polo negativo (cátodo) y en soluciones fuertemente alcalinas, ellas cargan negativamente, migrando hacia el polo positivo (ánodo).

                    Existe un pH óptimo (punto isoeléctrico) en el cual la molécula proteica no se moviliza cuando es puesta en un campo eléctrico. Este punto isoeléctrico no es, estrictamente dependiente de la naturaleza de la molécula proteica, sino que depende de la naturaleza de los otros iones que integran la solución tampón.

                    Las proteínas que se encuentran en su punto isoeléctrico son menos solubles. Así mismo, no se produce el fenómeno de electroforesis. Las cargas que adquieren las moléculas proteícas son cargas netas repeliéndose ellas unas con otras, lo que proviene en precipitación y agregación.

                    En la composición de las proteínas se encuentran una variedad de radicales de aminoácidos, por eso entran en interacción con muchos compuestos (ácidos, iones de metales, alcoholes, etc) y también compiten con ellos por la molécula del solvente (agua). En muchos casos el resultado de los procesos indicados es la precipitación de las proteínas. Las sutancias que destruyen la organización estructural de la molécula proteica (es decir, las estructuras cuaternarias, terciaria e incluso la secundaria) conllevan a la alteración de las propiedades físico-químicas y biológicas de la proteína. A este fenómeno se llama desnaturalización.

Los factores desnaturalizantes se dividen en químicos, físicos y biológicos. Los grupos más amplios son los químicos (ácidos, metales pesados, alcaloides, sustancias tensoactivas, etc.) y físicos, calor, radiación, ultrasonido, etc.) La desnaturalización biológica la pueden provocar enzimas proteolíticas, como tripsina que destruyen los niveles superiores de organización de la molécula proteica, antes que sea n hidrolizado los enlaces peptídicos.

La desnaturalización altera las propiedades físico-químicas de la proteína, en particular, su solubilidad. Es así que ella se hace menos hidrofílica y precipita fácilmente. La desnaturalización frecuentemente es irreversible, pero en una serie de casos, la separación de los agentes desnaturalizantes conllevan a la restitución de la conformación inicial de la molécula proteica y de sus propiedades naturales (Renaturalización)

• MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS:

Procedimiento:

Experimento 2. Precipitación de proteínas por ácidos inorgánicos

1. En un tubo de ensayo coloque 3 mL de albúmina diluida al 10%, agregue luego, con mucho cuidado 0,5 mL de HCl concentrado, medido con una pipeta con bombilla, la cual debe introducir hasta el fondo del tubo que contiene la proteína y recién dejará caer el contenido.

2.Se formará en la interfase de los líquidos un anillo blanquecino llamado anillo de floculación, cuyo grosor será proporcional a la cantidad de proteína de la muestra.

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