Diseño De Medios De Cultivo

Objetivo

Diseñar un medio de cultivo ad hoc al metabolismo del un microorganismo específico, así como entender la importancia de cada componente y su relación con el organismo microbiano.

Introducción

Los medios de cultivo se encuentran presentes tanto en la naturaleza como en formas sintetizadas por el hombre, en la naturaleza el medio ambiente brinda insuficientes nutrimentos para el crecimiento de microbios. Los microorganismos se desarrollan en la mayoría de los ambientes, principalmente en los que les otorgan las condiciones mínimas suficientes para crecer, sin embargo en condiciones oligotróficas y otros factores ambientales adversos, no todos los microorganismos logran sobrevivir..(Brock, 2004).

Por esta razón, al diseñar un medio de cultivo, los componentes seleccionados para conformarlo juegan un papel fundamental para que el crecimiento microbiano sea exitoso, de ahí la importancia de conocer el metabolismo de el o los microorganismos que se desean cultivar, ya que saber que compuesto funciona como fuente de energía nos brinda el componente principal del medio a diseñar, por ejemplo la lactosa, utilizada por el Lactobacillus bulgaricus, de la cual obtiene la energía a partir de un proceso de fermentación, si se pretendiera diseñar un medio de cultivo para este microorganismo, se debe tomar en cuenta la adición de la lactosa.(Tortora, 2010).

También se deben analizar los componentes traza, de los que el microorganismo tomará nutrimentos, como compuestos que su organismo no puede sintetizar. Así como es importante conocer los nutrientes que requiere el medio para el desarrollo del microorganismo, también resulta muy relevante saber que compuestos resultan del metabolismo de este, y si el microbio puede soportarlos, por ejemplo, existen microorganismos que producen ácidos al final de su metabolismo pero no son capaces de sobrevivir en ambientes con un pH bajo, por lo que tiene que esta característica tiene que ser tomada en cuenta para el diseño correcto de un medio de cultivo que, además de proporcionar nutrientes, brinde un medio exterior acorde a las necesidades del microorganismo.(Tortora, 2010).

Resultados

•Medio Sólido•

Equipo #1. Se inoculó saliva por medio del método de estriado, siguiendo las indicaciones de la técnica, después se incubó durante 24hrs. a 37°C.

Pasado este tiempo el cultivo fue sometido a observación, pero no presentó crecimiento. Ver Figura1.

Equipo #4. Se inoculó Saccharomyces bayanus en medio sólido, el cultivo fue incubado a temperatura ambiente durante 24hrs.

Después se observó y manifestó un crecimiento irregular de menos de una cuarta parte de la caja petri, colonias circulares, color blanquecino, con borde lobulado. Ver Figura 2.

•Medio Líquido•

Equipo #1. Se inoculó una gota de Yakult (Lactobacillus caseí shirota) en tubos que contenían medio líquido, después se incubó durante 24hrs. a una temperatura de 37°C .

Una vez cumplido este periodo de tiempo al revisar los tubos, no se logró observar algún tipo de turbidez, por lo cual se deduce que el crecimiento fue mínimo o nulo. Ver Figura 3.

•Medio Semisólido•

Equipo #4. Se inoculó una pequeña muestra de Saccaromiyces bayanus, en tubos con medio semisólido (inclinados), fueron incubados a temperatura ambiente durante 24hrs.

Ya que se cumplieron las 24hrs. de incubación, se observaron y presentaron turbidez, por lo cual se dedujo que hubo aumento de biomasa. Ver Figura 4.

Discusión

La composición del medio de cultivo sólido semi-definido, donde se pretendía cultivar Escherichia coli, brindaba los nutrimentos necesarios para el crecimiento favorable del microorganismo, pero la manera de inocular no fue la correcta, ya que la E. coli utiliza la lactosa, sólo en condiciones anaerobias, y se debió inocular bajo el medio de cultivo o entre dos capas de éste. Por lo que creemos el crecimiento del microorganismo se vio mermado. En el medio de cultivo líquido semi-definido se experimentó una situación similar al no poder observar ningún tipo de turbidez, por lo tanto procedimos a investigar las razones de esto. El Lactobacillus casei shirota es un microorganismo heterofermentativo , por lo cual decidimos que se debió de adicionar una mayor gama de hidratos de carbono para que el microorganismo creciera con mayor rapidez, al inicio se pensaba que el crecimiento fallido se debió al descontrol de la temperatura, al perderse la alimentación de electricidad a la incubadora, pero al indagar nos dimos cuenta que el Lactobacillus casei shirota soporta amplios rangos de pH

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