Enzimología

Enzimología 1:

Actividad Amilasa

Autores: Benavides, Pedro

Bernal, Catalina

Vallejos, Karen

Docente: González, Pamela

Fecha Práctico: 08/10/2013

Fecha de entrega: 15/10/2013

Objetivos

 Comprobar la influencia de la concentración enzima sobre la actividad de la enzima amilasa salival humana.

 Estudiar la cinética de la enzima amilasa salival humana sobre el almidón de una determinada temperatura.

Resultados

Efecto de la temperatura sobre la Hidrolisis enzimática del almidón.

TABLA N° 1. Diferenciación de las preparaciones enzimáticas.

Tubos

Solución almidón Suero fisiologico

Preparación enzimática

Temperatura ° C Reacción digestión Almidón Resultado

1 5 mL 1 mL 0 mL 37° Azul oscuro Hidrolisis parcial

2 5 mL 0,9 mL 0,1 mL 37° Lila Hidrolisis parcial

3 5 mL 0,8 mL 0,2 mL 37° Morado Hidrolisis parcial

4 5 mL 0,5 mL 0,5 mL 37° Lila claro Hidrolisis total

5 5 mL 0 mL 1 mL 37° Incoloro Hidrolisis total

Observaciones: pasado los 15 minutos y al adicionar Yodo el volumen de las diferentes soluciones se mantuvo igual, pero no sus colores.

TABLA N° 2.

Coloraciones de la preparación enzimática.

Tubos Solución Soluciones de Amilasa Temperatura Color de la Reaccion

A 3 mL Benedict 1 mL Amilasa 37°

1 1 gota Yodo 1 mL Amilasa 37° Azul oscuro

2 1 gota Yodo 1 mL Amilasa 37° Lila

3 1 gota Yodo 1 mL Amilasa 37° Morado

4 1 gota Yodo 1 mL Amilasa 37° Lila transparente

5 1 gota Yodo 1 mL Amilasa 37° Lila claro

6 1 gota Yodo 1 mL Amilasa 37° Incoloro

B 3 mL Benedict 1 mL Amilasa 37°

A 3 mL Benedict 1 mL Amilasa 100° Verde musgo

B 3 mL Benedict 1 mL Amilasa 100° Café o ladrillo molido

Observaciones: soluciones de Benedict con amilasa a una temperatura de 100º C con un determinado tiempo de 10 min.

¿Cuál es el objetivo de realizar la medida de la actividad enzimática a diferentes tiempos?

La importancia radica en que el tiempo es un indicador de si la reacción es efectiva al momento de que la enzima entre en contacto con el sustrato, por ende la actividad enzimática, la velocidad y el producto de la reacción.

Refiérase a la razón para utilizar un reactivo de caracterización de hidratos de carbono en la determinación de la actividad de la amilasa salival, que es una proteína.

La razón es que dado que la amilasa salival es una enzima que puede hidrolizar enlaces glucosidicos y transformar el almidón o grandes cadenas carbonatadas en azúcares más simples y por medio del yodo comprobar si el carbohidrato fue totalmente degradado a través de capacidad catalítica de la amilasa salival

Discusión.

La amilasa también denominada sacarosa o ptialina, es una enzima hidrolasa que tiene la función de catalizar la reacción de hidrolisis de los enlaces 1-4 del componente a-Amilasa al digerir el glucógeno y el almidón para formar azucares simples, se produce principalmente en las glándulas salivales (sobre todo en las glándulas parótidas ) y en el páncreas .Tiene actividad enzimática eficaz a un PH de 7.La enzima ocupada en el siguiente practico actúa más rápidamente bajo condiciones como un PH con poca variación o temperatura constante como los 37° con los cual trabajaremos (temperatura promedio de un humano). "La principal función digestiva de la saliva es la acción de la amilasa salival sobre el almidón. La amilasa salival

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