IDENTIFICACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFÍA EN PAPEL

IDENTIFICACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFÍA EN PAPEL

Luis Antonio Bernal Zaldaña.

Fabiola Yamileth Mineros Bonilla

00088917

Miércoles 1:30, semana B

03 de abril de 2019

Introducción: La cromatografía es un tipo de técnica aplicada para la separación de varios elementos que conjugan a una mezcla, esta división se fundamenta en las características que posea cada elementos, haciendo énfasis en la capacidad de interacción de cada componente de la mezcla o de la solución con un solvente. La cromatografía a estudiar será la de papel, es la más básica, en la que claramente su nombre lo dice, se utilizará papel filtro, hojas y diferentes tipos de eluyentes con la finalidad de demostrar experimentalmente qué tan afines son estos entre sí, y se demostrará de acuerdo a la capacidad de separación de pigmentos que tengan estos. En el proceso van a intervenir factores como velocidad, polaridad entre sustancias y distancias recorridas.

1. Reacciones.

1. Describa y esquematice la o las moléculas de los pigmentos presentes en sus hojas según el color observado (puede colocar imágenes). 

[pic 1][pic 2][pic 3][pic 4]

Figura 1. Pigmentos obtenidos al utilizar etanol como eluyente. [Fotografía tomada en el laboratorio el día 27 de marzo de 2019].

[pic 5][pic 6][pic 7][pic 8][pic 9]

Figura 2.  Pigmentos obtenidos al utilizar tolueno como eluyente. [Fotografía tomada en el laboratorio el día 27 de marzo de 2019].

[pic 10][pic 11][pic 12]

Figura 3. Pigmentos obtenidos al utilizar éter etílico como eluyente. [Fotografía tomada en el laboratorio el día 27 de marzo de 2019].

Los pigmentos vegetales presentes en las hojas de espinaca según los colores observados fueron los siguientes:

• Clorofila: Hay cinco tipos principales de clorofila: a, b, c y d, más una molécula relacionada que se encuentra en procariontes llamada bacterioclorofila. En las plantas, la clorofila a y clorofila b son los principales pigmentos fotosintéticos. Las moléculas de clorofila absorben longitudes de onda azules y rojas, como se demuestra con los picos en los espectros de absorción anteriores. A nivel estructural, las moléculas de clorofila se componen de una cola hidrófoba ("que le teme al agua") que se inserta en la membrana del tilacoide y una cabeza de anillo de porfirina (un grupo circular de átomos que rodean a un ion magnesio) que absorbe la luz [1].

[pic 13]

Figura 4. Estructura molecular de la clorofila a y b.

Aunque tanto la clorofila a como la clorofila b absorben luz, la clorofila a tiene una función única y crucial al convertir la energía de la luz en energía química. Todas las plantas fotosintéticas, algas y cianobacterias contienen clorofila a, mientras que solo las plantas y algas verdes contienen clorofila b, junto con algunos tipos de cianobacterias.

Debido a la función central de la clorofila a en la fotosíntesis, todos los pigmentos utilizados además de la clorofila a se conocen como pigmentos accesorios, que incluyen otras clorofilas, así como otras clases de pigmentos, como los carotenoides. El uso de pigmentos accesorios permite la absorción de una gama más amplia de longitudes de onda y, por lo tanto, una captura mayor de energía de la luz solar.

• Xantófilas: son compuestos químicos parecidos a los carotenos, y a diferencia de estos, además de tener carbono e hidrógeno contienen uno o más átomos de oxígeno dentro de la molécula, pero al igual que los carotenos, presentan colores llamativos (rojo, naranja y amarillo) [1].

[pic 14]

Figura 5. Estructura molecular de la xantófila.

1. Explique la función antioxidante de los betacarotenos (incluya reacciones o mecanismos de reacción).

R// β-caroteno. Carotenoide con actividad de provitamina A, siendo 1 equivalente de actividad de retinol (EAR) (μg) igual a 1/12 μg de β-caroteno + 1/24 μg de otros carotenoides con actividad de provitamina A (28). Para hacer el cálculo de EAR para los carotenoides que actúan como provitamina A, deben tomarse en cuenta una serie de factores: tipo de carotenoide, matriz en la que se encuentre, tipo de proceso al que es sometido el alimento, interacciones entre carotenoides, grasa y fibra, el estado nutricional, edad e infección por parásitos. Estudios han reportado que su relación es más eficiente en la protección del riesgo de cáncer en piel como consecuencia de la radiación UV. Ya que el β-caroteno inhibe a las ERON y al oxigeno singulete producido por la peroxidación lipídica en los liposomas y en los sistemas biológicos, actuando como agente fotoprotector que bloquea las reacciones fotoquímicas en la epidermis las cuales involucran al oxigeno singulete y a radicales de oxigeno generados por la exposición UV [2].

La acción del β-caroteno frente al radical peroxilo generaría otro radical con el carbono central estabilizado por resonancia:

[pic 15]

Figura 4.  Participación del β-caroteno en la formación de ERON [2].

1. Resultados

1. Calcule el Rf de los pigmentos separados en el cromatograma a partir del centro de la mancha, utilice la siguiente fórmula:

[pic 16]

1. Anote las características de Rf y el color de cada pigmento separado con el solvente usado, Identifique los pigmentos con esos antecedentes.

1. ¿Qué colores observa en el extracto iluminado, de acuerdo a las condiciones experimentales propuestas?

Tabla 1. Identificación y cálculo de Rf de pigmentos vegetales en hojas de espinaca por medio de cromatografía en papel, utilizando etanol, tolueno y éter etílico.

...