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Informe de laboratorio LABORATORIO DE BIOQUIMICA II


Enviado por   •  23 de Noviembre de 2016  •  Informe  •  2.086 Palabras (9 Páginas)  •  1.240 Visitas

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UNIVERSIDAD DEL CAUCA[pic 1]

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES, EXACTAS Y DE LA EDUCACIÓN

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA II

II PERIODO DE 2016

CUERPOS CETÓNICOS

Salamanca A, Camayo F.

Química, Facultad de Ciencias Naturales Exactas y de la Educación, Universidad del Cauca, Popayán Colombia

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  1. Abstract

For the determination of ketone bodies in the urine, urine was used fasting and another after ingesting food. testing was conducted to characterize different ketone bodies present in these samples. The test Griebel and Weiss is specific to acetone test Legal determines the presence of acetone and acetoacetate, test Gerhardt is characteristic for acetoacetate, test Lieben is characteristic for acetone test Arreguine is characteristic for acetoacetao , with which the presence of ketone bodies in different urine samples was determined.

  1. Objetivos.
  • Determinación cualitativa de cuerpos cetónicos mediante la aplicación de una serie de reacciones químicas.
  • Realizar pruebas cualitativas con el uso de un blanco y un patrón para la determinación de cuerpos cetónicos en una muestra de orina antes y después del desayuno.
  1. Datos y resultados.

Tabla # 1. Resultados de las pruebas Cualitativas.

Prueba

                 Coloración    

Ayuno

Legal (caract. De la acetona y en acetoacetato)

Muestra de orina

Rojo

Muestra patrón

Rojo intenso

Muestra blanco

Amarillo

Prueba de Gerhardt

Muestra de orina

Precipitado amarillo ++  

Muestra de patrón

Precipitado amarillo +

Muestra blanco

No se observa precipitado

 Prueba de Lieben

Muestra de orina

Rojo claro

Muestra de patrón

Rojo intenso  

Muestra blanco

No reacción

Griebel y Weiss

Cristales amarillos

Cristales amarillos

Prueba arreguine

H2SO4

UV

Muestra de orina

Rojo

Azul

Muestra patrón

Rojo

Negativo

Blanco

Rojo

Negativo

  1. Discusión de Resultados.

Figura # 1. Reacción para la formación de cuerpos cetónicos.

[pic 2]

La formación de acetoacetato se lleva a cabo en tres reacciones:

La formación de acetoacetil-CoA se produce por condensación de dos moles de acetil-CoA. Esta reacción es esencialmente una inversión de la tiolasa (HADHB o ACAA2) reacción catalizada de β-oxidación, pero es en realidad catalizada por la enzima mitocondrial acetoacetil-CoA tiolasa (codificada por el gen ACAT1). La segunda es la condensación de acetoacetil-CoA con un tercer acetil-CoA por la HMG-CoA sintasa que forma β-hidroxi-β -metilglutaril-CoA (HMG-CoA: que también es un precursor en la biosíntesis del colesterol). El mecanismo de reacción recuerda la reacción reversa catalizada por la tiolasa, en la cual, en el sitio activo un grupo tiol forma un intermediario acil-tioéster. En la tercera se da la degradación de HMG-CoA a acetoacetato y acetil-CoA, por la HMG-CoA liasa; el mecanismo de esta enzima es análogo a la reacción reversa de la citrato sintasa. En la actualidad no se sabe por qué esta aparentemente simple hidrólisis ocurre en esta manera indirecta, [1].

El acetoacetato puede ser reducido a D-β -hidroxibutirato por la β-hidroxibutirato deshidrogenasa.

Figura # 2. Formación del D-β -hidroxibutirato

[pic 3]

Este producto es el estereoisómero del L-β-hidroxiacil-CoA que participa en la β-oxidación.

El acetoacetato, que es un cetoácido, también puede ser descarboxilado no enzimáticamente a acetona y CO2.

La expiración de los individuos que tienen cetósis, enfermedad en la cual el acetoacetato se produce más rápido de lo que puede ser metabolizado tiene un característico olor dulce a acetona, lo cual puede ser un síntoma de la diabetes. El hígado libera acetoacetato y beta-hidroxibutirato que son llevados por el torrente sanguíneo a los tejidos periféricos para ser usados como combustibles alternativos, en los cuales son convertidos a acetil-CoA, [1].

Cuando el nivel de glicógeno en el hígado es alto la producción de β-hidroxibutirato aumenta. Cuando la utilización de carbohidratos es baja o deficiente, el nivel de oxaloacetato también será bajo, dando por resultado un flujo reducido durante el ciclo del TCA. Esto a su vez lleva a la liberación creciente de cuerpos cetónicos del hígado para que puedan ser utilizados como combustible por otros tejidos. En los estadios tempranos del ayuno, cuando los últimos remanentes de la grasa se oxidan, el corazón y el músculo esquelético consumirán sobre todo cuerpos cetónicos para preservar la glucosa para uso del cerebro. El acetoacetato y el β-hidroxibutirato, particularmente, también sirven como substratos importantes para la biosíntesis de lípidos cerebrales neonatales, [1].

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