LICENCIATURA EN QUIMICO FARMACEUTICO BIOLOGO

UNIVERSIDAD DE IXTLAHUACA CUI[pic 1][pic 2]

INCORPORADA A LA

UNIVERSIDAD AUTONOMA DEL ESTADO DE MEXICO

LICENCIATURA EN QUIMICO FARMACEUTICO BIOLOGO

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

PRACTICA No. 5

“PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO SOLIDOS”

PROFESORA: Q.F.B. SANDRA YESENIA RAMIREZ CARREON

SEMESTRE: 6º         GRUPO: 601  

EQUIPO No. 5

ALWIN LEON PERALTA

                                                                MARZO   2016

OBJETIVOS

• Preparar medios de cultivo (Agar Mac Conkey) tomando como base la metodología escrita por el fabricante y usando técnicas expuestas en clases teóricas de Microbiologia.
• Emplear la esterilización con calor húmedo usando la autoclave para la elaboración de medios de cultivo solidos.

DESARROLLO

Se comenzó por revisar las indicaciones de preparación que indicaba el fabricante, donde se especificaba la cantidad en gramos que se disuelven en un litro de agua destilada, asi como la forma de calentar la solución y la forma de estilización

Los datos que aportaba el fabricante son los siguientes:

FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA

Agar 13.5                         Mezcla de sales biliares 1.5

Cloruro de sodio 5.0                 Peptona especial 3.0

Cristal violeta 0.001                 Peptona de gelatina 17.0

Lactosa 10.0                         Rojo neutro 0.03

pH 7.1 ± 0.2

         PREPARACION

 Rehidratar 50 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45°C. Vaciar en cajas de Petri estériles. Conservar en refrigeración de 2 a 8ºC. (1)

Dado que para fines educativos solo se requeria preparar de 230 ml de hizo un reajuste de datos, los cuales fueron revisados por la encargada de laboratorio (2), y posteriormente registradas en una bitácora correspondiente, y el resultado de dichos cálculos (empleando una regla de tres) fueron los siguientes:

50 g de Agar Mac Conkey --------------1000 ml de agua destilada

X gramos de Agar Mac Conkey --------230 ml de agua destilada

Obteniendo el siguiente despeje:

X gramos de Agar Mac Conkey = [pic 3]

X gramos de Agar Mac Conkey = 11.5 gramos         

Esta cantidad en gramos de Agar Mac Conkey fue la que se uso, antes de pesar se tomaron 130 mililitros de agua destilada que se agregaron a un matraz Erlenmeyer de 500 ml, posteriormente  pesamos 11.5 g de Agar en una bascula granataria, dentro del laboratorio de microbiología, la cual poseía el numero 2, revisando que el equipo estuviera calibrado.

Al finalizar esto, se agito nuestra solución para eliminar grumos, y se midieron los mililitros de agua  destilada faltantes (100 ml) y la forma de adicionar al matraz Erlenmeyer fue deslizando el agua por la boca y girando el matraz para evitar que quedara materia pegada al matraz. Después de dejo reposar durante 15 minutos.

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