Laboratorio de enzimas

LABORATORIO #4: EVALUACIÓN DE CULTIVOS LÁCTICOS

J. García^[1], Y. Dominguez1, D. Romero1, D. Herrera1

RESUMEN

Las enzimas son el grupo más variado y especializado de las proteínas, su función es actuar como catalizadores, permitiendo que las reacciones que transcurren en los seres vivos puedan desarrollarse a un ritmo adecuado. Su capacidad catalizadora depende de su conformación, la supresión de alguno de sus niveles de estructuración, causa la pérdida de funcionamiento. En el laboratorio de Biotecnología de la Universidad de Córdoba del programa de ingeniería de alimentos, se realizó la determinación de la actividad enzimática, con el objetivo de determinar experimentalmente los parámetros de la ecuación de Michaelis – Menten en la producción de glucosa a partir de maltodextina catalizada por la enzima glucoamilasa a diferentes concentraciones de sustrato a travez del tiempo.

Palabras claves: Enzimas, glucosa, maltodextrina, sustrato, parametros

ABSTRACT

Microbial growth refers to tidy all the chemical components of a biological system increase. Increasing the number of microorganisms enables formation of colonies or populations. In the laboratory of Biotechnology, University of Córdoba program food engineering, microbial growth kinetics in submerged batch fermentation was performed, aiming to experimentally determine the kinetic parameters of the Monod equation (Yx / s, μ and μmax) in aerobic submerged fermentation batch Saccharomyces cerevisiae.

Keywords: Microbial growth, growth kinetics, equation Monod.

MATERIALES Y MÉTODOS

Determinación de la actividad enzimática y parámetros de la ecuación de Michaelis -Menten (Vmax y Km), según Luján D., 2013.

RESULTADOS

Para determinar la concentración de glucosa en el tiempo se tomó una muestra de 1 mL y se le aplicó el procedimiento de DNS para conocer la absorbancia dada por el espectrofotómetro. Luego, con ayuda de la curva de calibración obtenida (ver Tabla 1), en la que se conocía la concentración de glucosa por litro, se determina la concentración de glucosa en el tiempo de los datos tomados del sustrato inoculado con la enzima en el término de cada 10 min.

Al graficar los datos del laboratorio, se obtiene una curva que al linealizar nos arroja la ecuación que permitirá conocer la concentración de glucosa en los tiempos de las tomas de muestras, como se aprecia en la Figura 1.

Tabla 1. Datos para la curva de calibración DNS para determinar la concentración de glucosa

[pic 1]

Figura 1. Curva de calibración DNS para determinar la concentración de glucosa.

De la ecuación obtenida, se despeja X (concentración de glucosa en g/L), y por medio de la absorbancia obtenida por medio del espectrofotómetro a 575 nm se hallaron las concentraciones de glucosa obtenidas experimentalmente, como se observa en la Tabla 2.

Tabla 2. Concentración determinada de glucosa a partir de la ecuación de la curva de calibración.

En la tabla 2, se puede observar que a medida que transcurre el tiempo para cada una de las concentraciones evaluadas, la concentración de glucosa aumenta. Esto debido a que la glucosa es el producto que se genera de a desfragmentación de la maltodextrina con ayuda de la enzima.

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