TRABAJO PRÁCTICO NUMERO 2 MICROSCOPÍA I

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TRABAJO PRÁCTICO NUMERO 2

MICROSCOPÍA I

Alumnos:

Carla Muñoz

Isabel Acevedo

Victoria Prado

Geraldyn Sobarzo

Profesores

Nataly Contreras

Valentina Muño

INTRODUCCIÓN

De qué están formadas las cosas es una pregunta que los científicos han intentado resolver durante mucho tiempo. La curiosidad por saber que hay más allá de lo que el ojo humano permite ver solo pudo ser resuelta con la invención de instrumentos que cumplieran ese objetivo. Para la biología, la invención del microscopio por parte de Zacharias Jansen en el año 1590,^[1] marcó un antes y un después en el estudio de dicha área. A partir del descubrimiento de la célula, el microscopio se convirtió en una herramienta indispensable para el avance de las ciencias biológicas.

Actualmente existen varios tipos de microscopios y técnicas empleadas para superar las limitaciones físicas que impiden ver detalles cada vez más pequeños. Pues la resolución máxima del microscopio dependerá de la longitud de onda de la luz visible, así como la apertura numérica de sus lentes. Además, debido a la naturaleza misma de las estructuras celulares, es necesario el uso de distintas técnicas que permitan reconocerlas. Es así como se desarrollaron distintos tipos de microscopios, como lo son el electrónico de barrido, de fluorescencia, contraste de fases, óptico y confocal, siendo este último uno de los más avanzados tecnológicamente.^[2]

El objetivo del presente trabajo es lograr un acercamiento al microscopio óptico, así como sus características y funciones. Esto mediante su uso en la observación de distintos organismos y preparaciones biológicas, tratadas con algunos de los métodos más usados en la biología, como la fijación y tinción, técnicas utilizadas respectivamente para preservar muestras y destacar mediante colorantes algunos de sus componentes.^[3] 

La comparación de dichas preparaciones biológicas observadas con distinto aumento permitirá la identificación de las diversas estructuras que componen los organismos. Dependiendo del tipo de muestra (permanente o temporal), y si tiene tinción o no, estas estructuras serán más o menos fáciles de identificar. Finalmente, y para lograr una mejor presentación de las observaciones realizadas, se incluyen también representaciones graficas junto con el detallado y características de éstas.

Materiales y métodos

Al iniciar el trabajo se observaron y reconocieron todas las partes del microscopio, se buscó su aumento y su apertura numérica con el fin de conocer las distintas áreas del microscopio analizado. Luego se procedió a realizar esta misma observación pero esta vez en los oculares del instrumento y en el condensador. Se realizaron los cálculos pertinentes para obtener los valores de poder de resolución y límite de resolución con una ecuación anteriormente facilitada. Posteriormente se procedió a ocupar y a hacer funcionar el microscopio de forma en que se observaron muestras histológicas previamente preparadas. Se ocupó primeramente una muestra previamente preparada que contenía un trozo de papel que en su interior contenía una letra, se registró con un dibujo en base a la imagen producida en el aumento 4x y se tomaron notas de lo observado. Después se observaron distintas muestras histológicas. Se comenzó con el frotis de homo sapiens, se tomaron registros de su imagen esta vez con un aumento 40x, es decir con un mayor aumento que la muestra analizada anteriormente y se tomo registro de el con un dibujo. Se realizó el mismo procedimiento con el corte de intestino de Rattus norvegicus y se dibujó en base a la imagen formada a los 40x tomando registros gráficos. Con la allium cepa se realizó este proceso solo con una diferencia, se tenían dos muestras de ésta con la diferencia de que una estaba sometida a un proceso de tinción con azul de metileno y la otra muestra de  allium cepa se encontraba sin tinción de azul metileno, también se tomó registro de estas muestras con un dibujo en 40x de aumento. Discutimos los resultados.

Resultados

Actividad 1. Cálculo del aumento y límite de  del microscopio.

Resultados poder de aumento y apertura numérica Estos valores se observaron en cada uno de los cuatro objetivos, cada uno con su respectivo aumento y apertura numérica.

Resultados del aumento y apertura numérica de los oculares. Aquí se procedió a observar los valores pero en él y a multiplicar por el valor de los objetivos para sacar el aumento total.

Resultado de la apertura numérica del condensador, el cual se encontraba bajo la platina.

Resultado de los cálculos de límite de resolución y poder de resolución. Se ocupo una formula facilitada en la guía para sacar estos valores.

Actividad 2. Manejo del microscopio

La observaciones de la letra “e”: El aumento utilizado para su mejor visualización fue de 4X y la muestra es de tipo permanente, la letra se invierte debido a que el objetivo absorbe la luz que atraviesa al objeto proyectando una imagen formada por el ocular el cual proyecta una imagen de mayor tamaño e invertida. Al aumentar la muestra a 40X no se veía la totalidad de la imagen. En el transcurso de la observación se pudo notar levemente la textura del papel.

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