Coloraciones Coloidales

I.-INTRODUCCIÓN

En el presente tema abordaremos aspectos generales sobre estructura y función de los aminoácidos y las proteínas en el organismo, así como de los medios de laboratorio para identificar a los mismos.

Por la importancia y el papel que desempeña las proteínas, es necesario conocer la función de un grupo de ellas, como las proteínas plasmáticas, para tal efecto realizaremos una revisión general de las mismas.

Las Proteínas son sustancias cuaternarias, sus unidades fundamentales son los aminoácidos, los cuales pueden ser polares o no polares. Las proteínas se dividen en simples, que se componen sólo de aminoácidos y conjugadas, que además de aminoácidos llevan un grupo prostético que puede ser: metales, ácidos nucleicos, carbohidratos o lípidos.

II.-OBJETIVOS

 Reconocer la presencia de algunos aminoácidos en las proteínas.

 Adquirir información sobre algunas propiedades físicas y químicas de aminoácidos

 Conocer algunas propiedades de las proteínas.

 Conocer y determinar las diferentes propiedades físicas y químicas de los aminoácidos y proteínas

 Evaluar mediante pruebas físicas y químicas la presencia de aminoácidos y proteínas en las diferentes muestras.

 Emplear técnicas de reconocimiento de aminoácidos y de proteínas.

III.-MATERIALES

A. Materiales Biológicos:

 Huevos

 Agua de remojo de frejol.

 Jugo de papa.

 Carne molida.

 Pata de res.

 Jugos de semilla.

 Leche de vaca.

 Gelatina.

B. Materiales de Laboratorio:

 Tubos de ensayo.

 Vasos de precipitación.

 Pipetas.

 Embudos.

 Papel de filtro.

 Mechero.

 Probetas.

 Goteros.

 Trípode y rejillas.

C. Reactivos

 HCL 75%

 NaOH 40%

 NaOH 10%

 CuSO4 1%

 Alcohol 75%

 HNO3 (concentrado)

 Agua destilada

IV.- PROCEDIMIENTOS

4.1Experiencia 01: Reacciones de Precipitación

1. Numere el tubo de ensayo y coloque 3cc de solución de albumina en cada uno.

2. AL primer adicionar 1cc. de HCL75%

3. Al segundo tubo adicionar 1cc. de NAOH 10%.

4. Al tercer tubo adicionar 1cc. de CuSO4

5. Al cuarto tubo adicionar alcohol al 75%.

6. Al quinto tubo calentarlo ligeramente al mechero.

7. Observar el cambio de estado al contenido de cada tubo

4.2Experiencia 02: Reacción de Biuret.

1. Numere los tubos de ensayo del 1 al 5.

2. Trabaje según el cuadro siguiente:

Reactivo 1 2 3 4

Solución de albumina 2cc.

Jugo de semilla 2cc.

Leche de vaca 2cc.

NaOH 40% 2cc.

1ml. 1ml. 1ml. 1ml.

3. Luego agite los tubos y agregue 5 gotas de CuSO4 1% en cada uno de ello

4. Observe el cambio de coloración.

4.3 Experiencia 03: Reacción Xantoproteica.

1. Numere los tubos de ensayo del 1 al 5.

2. Trabaje según el cuadro siguiente:

Reactivo 1 2 3 4 5

Solución de albumina 2cc.

Leche 2cc.

Carne molida 2cc.

Semilla molida 2cc.

Gelatina 2cc.

HNO3 2cc.

1ml. 1ml. 1ml. 1ml. 1ml.

3. Observe y caliente al mechero cada tubo.

4. Observar el cambio de color en cada uno de ellos y dejar enfriar.

5. Agregar 1ml.de NaOH al 40% en cada tubo.

4.4 Experiencia 04: Reconocimiento de Albúminas.

1. Llevar 10gr. De carne molida con 50 ml de agua destilada.

2. Filtrar y recibir el agua del filtrado lavado en vaso de precipitación.

3. Calentar este último a 70°C.

4. Usar una muestra del agua del lavado y realizar una prueba de Biuret.

4.5 Experiencia 05: Reconociendo de Globulinas.

1. Adicionar la carne molida usada en la prueba anterior en una solución salina diluida (NaOH 10%) y llevar con ella.

2. Filtrar luego el agua del lavado y calentar a 70°C.

3. Usar una muestra de agua del filtrado y realizar una reacción de Biuret.

4.6 Experiencia 06: Colágeno.

1. Cocinar una pata de res cubierta de agua durante 02 horas.

2. Dejar enfriar el caldo y observar las variaciones.

3. Tomar una pequeña muestra del caldo y determinar la presencia de proteínas realizando una prueba de Biuret.

V.- RESULTADOS:

La estructura de las proteínas reúne las propiedades de disposición en el espacio de las moléculas de proteína que provienen de su secuencia de aminoácidos, las características físicas de su entorno y la presencia de compuestos simples o complejos que las estabilicen y/o conduzcan a un plegamiento específico, distinto del espontáneo. Por ello, deriva de sus componentes, es decir de la propia estructura de los aminoácidos, de cómo interaccionan químicamente éstos, de forma jerarquizada y específica, y evidentemente está en relación con la función a acometer en el destino celular.

Estructura primaria

La estructura primaria de las proteínas se refiere a la secuencia de aminoácidos., es decir, la combinación lineal de los aminoácidos mediante un tipo de enlace covalente, el enlace peptídico. Los aminoácidos están unidos por enlaces peptídicos siendo una de sus características más importante la coplanaridad de los radicales constituyentes del enlace.

La estructura lineal del péptido definirá en gran medida las propiedades de niveles de organización superiores de la proteína. Este orden es consecuencia de la información del material genético: Cuando se produce la traducción del RNA se obtiene el orden de aminoácidos que van a dar lugar a la proteína. Se puede decir, por tanto, que la estructura primaria de las proteínas no es más que el orden de aminoácidos

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