Aminoacidos y proteinas.

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Aminoácidos y proteínas

Departamento de Química*, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Universidad del Valle, Cali, Colombia A.A. 2536.

Fecha de Realización: 14 de Enero de 2016.

Fecha de Entrega: 16 de febrero de 2016.

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Metodología experimental

A continuación se describen los diferentes procedimientos llevados a cabo para verificar la presencia de aminoácidos y proteínas en un grupo de muestras determinadas:

a. Test de albumina 

se prepararon 5 tubos según como muestra la tabla 1. A cada tubo se le adicionó previamente 1 mL de albumina de huevo. Se calentaron en baño maria.

Tabla 1. Preparación de soluciones para el test de albumina

b. Prueba de Biuret

Se mezclaron 1 mL de clara de huevo con 1 mL CuSO4 al 5% y 1 mL de NaOH 10%. Se agitó la solución.

c. Reacción con formaldehído

Se mezclaron 1 mL de clara de huevo con 1 mL de formaldehído y algunas gotas de H2SO4 98%. Se agitó la solución.

d. Reacción xantoproteica

Se mezclaron 1 mL de clara de huevo con 0,5 mL de HNO3 65% y se tomó nota de lo observado. Posteriormente se añadieron gotas de NaOH concentrado y se tomó apunte de lo observado.

e. pH de la glicina

Se midió el pH usando papel indicador mixto y con indicador tornasol.

f. Complejo de glicina y cobre

Se prepararon dos soluciones:

• 1 g de Acetato de cobre + 12 mL de agua tibia + 10 mL de etanol
• 0,7 g de glicina + 12 mL de agua tibia

Luego se mezclaron ambas soluciones y se dejaron en baño María a 70°C/15 min, enfriándose luego en baño de hielo y filtrado al vacío.

Datos y observaciones

a. Test de albumina 

Tubo 1: La solución de albumina y ácido clorhídrico presentó una apariencia espesa debido a la coagulación. La coloración fue blanca, tal como lo muestra la figura 1.

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Figura 1. Reacción entre la albumina de huevo y el ácido clorhídrico.

Tubo 2: La solución de albumina con NaOH se tornó incolora y no coaguló, tal como lo muestra la figura 2.

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Figura 2. Reacción entre la albumina de huevo y el NaOH.

Tubo 3: La solución de albumina con ácido nítrico tomó un color amarillo y coaguló. En la parte inferior del tubo se puede apreciar una fase traslucida de color amarilla, tal como lo muestra la figura 3.

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Figura 3. Reacción entre la albumina de huevo y el ácido nítrico.

Tubo 4: La solución de albumina con etanol formó dos fases, la superior incolora y la inferior blanca de  textura espesa. En la base del tubo se observó un líquido incoloro.

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Figura 4. Reacción entre la albumina de huevo y el etanol.

Tubo 5: La solución de albumina de huevo con sulfato de cobre permitió identificar un precipitado azul celeste de consistencia lechosa como lo muestra la figura 5.

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Figura 5. Reacción entre la albumina de huevo y el sulfato de cobre.

b. Prueba de Biuret

Inicialmente y antes de someter a calentamiento la solución, se observó una coloración purpura oscura como lo muestra la figura 6.

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Figura 6. Solución de albumina de huevo con sulfato de cobre y NaOH.

Después de calentar la solución, se observó un precipitado oscuro y un sobrenadante líquido marrón (figura 7).

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Figura 7. Reacción de albumina de huevo con sulfato de cobre y NaOH posterior al calentamiento.

c. Reacción con formaldehído

Se observó una solución formada por dos capas, un sobrenadante y un precipitado sólido de coloración blanco (figura 8).

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Figura 8. Reacción de albumina de huevo con ácido sulfúrico y formaldehído.

d. Reacción xantoprotéica

Inicialmente la reacción de la albumina con el ácido nítrico presentó un color amarillo con zonas blancas como lo muestra la figura 9.

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Figura 9. Solución de albumina de huevo con ácido nítrico.

Después de calentar la solución se observaron características similares a las descritas previamente (figura 10).

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Figura 10. Solución de albumina de huevo con ácido nítrico sometida a calentamiento.

Después de adicionar el NaOH, la solución tomó una coloración amarilla-naranja, tal como lo muestra la figura 11.

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Figura 11. Solución de albumina de huevo con ácido nítrico sometida a calentamiento y con posterior adición de NaOH.

e. pH de la glicina

A partir de la cinta indicadora de pH, la cual evalúa colorimétricamente el pH de una solución, se demostró cualitativamente que el pH de la glicina es aproximadamente 6 (figura 12).

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Figura 12. Medición de pH de la glicina. El pH mostrado es aproximadamente de 6.

f.  Complejo de glicina y cobre

Después del proceso de calentamiento en baño maria, se observó la formación de dos fases, una líquida y otra sólida adherida al fondo. La solución filtrada contenía pequeños cristales azules, indicando la formación de una sal de glicina (figura 13).

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