CULTIVO-Y-AISLAMIENTO-E-IDENTIFICACIÓN-BIOQUÍMICA-DE-BACTERIAS (1)

Microbiología

Practica

CULTIVO Y AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA DE BACTERIAS

Ortega Miranda Zuly

4R42

I. COMPETE NCI A E SPEC ÍFIC A[pic 14]

• Aplica técnicas de siembra y aislamiento para la identificación de diferentes tipos de bacterias.
• Identifica las bacterias por medio de sus reacciones bioquímicas en los diferentes medios de cultivo.

II. ABSTR ACT[pic 15]

Se preparó el material a utilizar para cultivo, aislamiento y pruebas bioquímicas, según indicaciones para cada medio de cultivo. Se Identifica su material, esterilizar y resguardar para la siguiente sesión. Aplicar la técnica de aséptica de principio a fin de la práctica.

DOCU MENT O DE TRABAJO

Cada equipo deberá tener 4 cajas Petri con su respectivo medio de cultivo, para la siembra y aislamiento se hace por la técnica de estría cruzada

Colocar las cajas inoculadas dentro de una incubadora a 37 °C de 24 a 48 horas.

III. INTRODUCCI ÓN[pic 16]

[pic 17]El aislamiento es la separación de un determinado microorganismo del resto de microorganismos que lo acompañan. El método más usual es la siembra por estría sobre un medio de cultivo solido adecuado dispuesta en una placa de Petri. Para ello se toma una pequeña cantidad de muestra con un asa de platino y se reparte sobre la superficie del medio de cultivo. Sobre el medio quedan separadas e inmovilizadas las células bacterianas. Tras la incubación en condiciones adecuadas, cada célula viable origina una colonia visible. Cada colonia tiene unas características determinadas en cuanto a su forma, borde,

Elevación, tamaño, consistencia,  etc.

(Técnicas de cultivo, aislamiento).

Criterios para la diferenciación de colonias:        El aspecto de las colonias, su coloración tamaño, etc. Permiten diferenciar diferentes bacterias, aunque son propiedades generales muy influenciadas por las condiciones de cultivo, las colonias pueden ser opacas, traslucidas o transparentes. Algunas producen pigmentos fluorecentes cuando se iluminan con la luz ultravioleta. Otras aparecen con superficie pulverulenta, otras son lisas, o rugosas, o posees anillos concéntricos. En ocasiones el olor también es característico.

(Técnicas de cultivo, aislamiento).

Características microscópicas. El estudio microscópico en fresco y tras tinción revela la forma, la manera de agruparse, la estructura de las células y su tamaño. Las tinciones son el primer paso, y ocasionalmente el único, para la identificación bacteriana. Las tinciones más utilizadas e imprescindibles son la del azul de metileno y la de Gram. La tinción de Gram es, a menudo, la primera y única herramienta de la que nos servimos para hacer un diagnóstico provisional en el proceso de identificaciÛn de la mayorÌa de las bacterias teniendo en cuenta tambiÈn el tipo de muestra y el diagnóstico presuntivo del proceso infeccioso. Estos son algunos de los términos utilizados para preparaciones teñidas:

- tinción: uniforme, irregular, unipolar, bipolar, etc.

- forma: cocos, bacilos, cocobacilos, filamentosos, bacilos curvos, etc.

- cápsula: presente o ausente - endosporas: ovales, esféricas, terminales, subterminales

- tamaño: cortos, largos, etc. - bordes laterales: abultados, paralelos, cóncavos, irregulares

- extremos: redondeados, puntiagudos

- disposición: parejas, cadenas, tétradas, racimos, etc.

- formas irregulares: variación en forma y tamaño, ramificados, fusiformes, etc.

(Fernandez Ana, 200).

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IV MATERIALES[pic 19]

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V. METODO LOGI A[pic 23]

a) preparación de medios de cultivo y esterilización de cristalería y (1ra se sión).

i. El alumno deberá preparar todo el material a utilizar para cultivo, aislamiento y pruebas bioquímicas, según indicaciones para cada medio de cultivo.

ii. Identificar su material, esterilizar y resguardar para la siguiente sesión.

b) Siembra (2da sesión)

1. Aplicar la técnica de aséptica de principio a fin de la práctica.

ii. Cada equipo deberá tener 4 cajas Petri con su respectivo medio de cultivo

iii. Para la siembra y aislamiento se hace por la técnica de estría cruzada

iv. Colocar las cajas inoculadas dentro de una incubadora a 37 °C de 24 a 48 ho- ras.

c) MORFOLOGÍA COLONIAL Y MICROSCÓPICA Y SIEMBRA DE PRUEBAS BIOQUÍMICAS

MORFOLOGÍA COLONIAL

i. De las colonias observadas en los difeDOrCU MENT OeDE TRABAJO   ntes medios realizar su morfología colo- nial describiendo lo siguiente:

y luz reflejada.[pic 24]

ii. Escoger la colonia que más haya poblado los medios para realizar es lectura.

MORFOLOGÍA MICROSCÓPICA

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