Determinación del Nitrito y del Fosfato

UNIVERSIDAD DE VALPARAÍSO[pic 1]

FACULTAD DE CIENCIAS DEL MAR Y DE RECURSOS NATURALES

CARRERA DE BIOLOGÍA MARINA

BMA-325  OCEANOGRAFÍA QUÍMICA DE PROCESOS

Determinación del

Nitrito y del Fosfato

Integrantes:

- Alanis General

- Aranza Gómez

- Constanza Morales

- Ignacio Córdova

- Marcela Rojas

- Selena Guerrero

Asignatura: Oceanografía Química de Procesos.

Profesor: Italo Masotti.

Resumen:

El objetivo de esta actividad de laboratorio es comprender y adquirir conocimientos acerca de la metodología de determinación de absorbancia de nitrito y fosfato en una muestra de agua de mar, agua potable y destilada. Las muestras de agua de mar fueron recolectadas desde una poza de Montemar.

El práctico comenzó con la preparación de muestras para ambas metodologías de determinación, por lo cual se ocuparon 18 matraces Erlenmeyer (9 para cada metodología), así se dió paso en primer lugar a la realización de la determinación de nitrito en estas muestras agregando reactivos de sulfanilamida y naftil respectivamente. Terminada esta parte, se continuó con la determinación de fosfato para la cual se debió agregar 2 reactivos a las muestras, la de Ácido ascórbico acidificado y un mezclado de Antimonio-molibdato. Finalmente al obtener los resultados de estas reacciones se continuó al último paso el cual fué determinar la absorbancia en un espectrofotómetro el cual rápidamente fue calibrado para medir a 543 nm y 880 nm respectivamente

Introducción

En nuestra vida cotidiana estamos expuestos a múltiples compuestos químicos, muchas veces producidos como subproductos de la actividad humana, estas propiedades químicas nos permiten caracterizar las masas de agua y entender todo lo que se produce en ellas, no sólo por interés científico, sino también para el aprovechamiento de los diferentes recursos que ofrece nuestro mar. Se tiene conocimiento de que en el medio marino las sales inorgánicas más importantes son el nitrógeno y el fosfato cuyas cantidades están limitadas por la aparición de la picnoclina.

El nitrito es uno de los compuestos que se forman a lo largo de los ciclos bioquímicos que se pueden encontrar en nuestro océano, asociado a la oxidación del amonio que ocurre durante la nitrificación o a la reducción del nitrato. Es un nutriente de importancia en la productividad marina y un compuesto indispensable para mantener a las poblaciones de fitoplancton, además, debido a que la concentración de nitrito es baja en comparación con los nitratos, puede ser un indicador de la inestabilidad del sistema encontrarlo en altas cantidades, esto a su vez es medible con un método que es capaz de evaluar concentraciones entre 0.1 μM·L-1 a 38 μmol·L-1 (Strickland & Parsons 1965). El NO2- presente en el agua de mar reacciona con la sulfanilamida en una solución ácida produciendo un compuesto diazo. Este compuesto se acopla con N-(1-Naftil)-etilendiamina formando un compuesto coloreado rosado. La extinción producida por este compuesto se mide espectrofotométricamente.

El fosfato se encuentra disuelto en el agua marina, en la forma de metafosfato cálcico, su importancia radica en la síntesis de la materia orgánica, siendo imprescindible para el fitoplancton, ya que de no encontrarse, limitaría la productividad primaria. El método de medición para este compuesto es una modificación del que realizó Murphy & Riley en 1962. Esta modificación consiste en separar el reactivo único en dos, el primero de ellos contiene ácido sulfúrico, molibdato de amonio y antimonio trivalente, mientras que el segundo es la solución de ácido ascórbico. El uso de soluciones separadas hace más estables a los reactivos y facilita la compensación por turbidez.

El fosfato de la muestra es sometido a reacción con hexamolibdato en medio ácido, formando un complejo de ácido molibdofosfórico. Al agregar el ácido ascórbico al medio reduce al molibdeno determinando con ello una coloración azul del heteropoliácido, cuya intensidad es proporcional a la concentración de fosfato y es medida espectrofotométricamente a 880 nm.

Objetivo general

-Determinar la absorbancia del nitrato y del fosfato en triplicado de agua destilada, de agua potable y de agua de mar.

Materiales y métodos  

Para realizar de la determinación de nitrito y fosfato  se emplearon los siguientes materiales y reactivos:

Materiales:

•  Espectrofotómetro UV-Visible:  Este equipo  permite la determinación cuantitativa de compuestos absorbentes de radiación electromagnética en solución, para longitudes de onda comprendidas entre 200 y 1100 nm, para esta laboratorio se utilizó el espectrofotómetro para longitudes de onda de 543 nm para el nitrito y 880 en el fosfato (UPC 2021).
•  Celdas de vidrio de 10 cm de longitud.
•  Vasos precipitados y Matraces Erlenmeyer de 125 ml.
•  Probetas de 50 ml.

Para la determinación de nitrito y fosfato, se utilizaron en total 18 matraces de Erlenmeyer de 125 ml, en los cuales se procedió a agregar 50 ml con probeta, 6 de agua destilada, 6 de agua potable y 6 de agua de mar. Para luego agregar un 1 ml del reactivo correspondiente (en 9 matraces se colocaron los reactivos A de Sulfanilamida y los reactivos B de Naftil, los cuales estaban señalados para el nitrito, mientras que en los otros 9 matraces, se emplearon los reactivos antimonio-molibdato y ácido ascórbico acidificado). Después de introducir cada reactivo se procedió a mezclarlos lentamente afirmados de la parte superior del matraz Erlenmeyer teniendo precaución con las salpicaduras, posterior a esto, se dejaron estar las matraces durante dos minutos. Finalmete se midió la absorbancia de los matraces de nitrito a 543 nm y de los matraces de fosfato a 880 nm en el espectrofotómetro.

Para la realización de los datos se debía obtener la absorbancia de la cubeta, en los cuales el espectrofotómetro para el nitrito indicó un valor de 0,009 y para el fosfato un valor de 0,008, estos datos se deben restar con los valores entregados por el espectrofotómetro.

En cada matraz se debe introducir la solución en las celdas de vidrios la cual la primera vez este debe votar y el la segunda introducción a la celda es utilizada, este procedimiento se realiza los 18 matraces para obtener el dato de absorbancia medida.

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