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..Determinar la concentración de albúmina en la clara de huevo por el método de Lowry.


Enviado por   •  29 de Marzo de 2016  •  Práctica o problema  •  897 Palabras (4 Páginas)  •  2.255 Visitas

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Universidad Nacional Autónoma de México[pic 1][pic 2]

Facultad de Estudios Zaragoza

Bioquímica Celular y de Tejidos l

Curva Estándar de Proteínas

Objetivos:

  • Desarrollar y analizar una curva estándar
  • Determinar la concentración de albúmina en la clara de huevo por el método de Lowry.

Análisis de resultados:

Contenido de cada tubo de la curva estándar.

Tubo

Blanco

1

2

3

4

5

6

7

Solución problema de proteínas

-

0.15

0.3

0.6

-

-

-

-

Solución patrón de proteínas ()[pic 3]

-

0.1

0.2

0.4

0.8

 Destilada[pic 4]

2.0

1.85

1.7

1.4

1.9

1.8

1.6

1.2

Reactivo 3

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

Agitar y dejar reposar 10 min.

Reactivo 4

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

Agitar inmediatamente y dejar reposar 20 min.

Medir absorbancia a 640 nm.

Tabla 1. Contenido de cada tubo de la curva estándar.

Absorbancias obtenidas

Tubo

1

2

3

4

5

6

7

Absorbancia

0.131

0.193

0.298

0.105

0.139

0.237

0.332

Tabla 2. Valores registrados durante la medición con el espectrofotómetro.

Valores para realizar la curva estándar de proteínas

Tubo

Concentración

absorbancia

blanco

0

0

4

0.01

0.105

5

0.02

0.139

6

0.04

0.237

7

0.08

0.332

Tabla 3. Resultados obtenidos en los tubos para la elaboración de la curva estándar

[pic 5]

Grafico 1.- Curva estándar de proteína (albúmina), así como los valores de regresión lineal.

Datos obtenidos estadísticamente

Coeficiente de correlación

Coeficiente de variación

0.9634

Cantidad de proteínas en las muestras problema

tubo

Cantidad (ml)

Absorbancia

Proteína (mg)

1

0.15

0.131

0.0218

2

0.3

0.193

0.0378

3

0.6

0.283

0.0611

Tabla 5. Cantidad de proteínas en la muestra problema por regresión lineal.

Cálculos de la cantidad de albumina presente en los 3 primeros tubos

Tubo 1

[pic 6]

Tubo 2

[pic 7]

Tubo 3

[pic 8]

Cuestionario

1.- ¿Cuál es el fundamento del método de Lowry?

Es un método colorimétrico de valoración cuantitativa de las proteínas. A la muestra se añade un reactivo que forma un complejo coloreado con las proteínas, según la ley de Lambert-Beer [pic 9]

...

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