EXTRACCION DE DNA

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS[pic 1][pic 2]

INGENIERIA BIOQUÍMICA – BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR

BITACORA PRÁCTICA AISLAMIENTO DE DNA

FIERROS MALDONADO AXEL RUBÉN  

RUIZ AVILA ERICK FRANCISCO

31/05/22

INTRODUCCIÓN

El primer registro que se tiene de un acercamiento al DNA fue planteado por el Biólogo y Médico Suizo Johan Friedrich Miescher que en la década de 1860 aisló de los núcleos celulares una sustancia ácida que denomino nucleína y posteriormente ácido nucleico.

Sin embargo, no se supo la naturaleza de estos compuestos sino 80 años después en la década de 1940 donde, Avery, MacLeod y McCarty establecieron que dicho material nucleico ácido contenía información hereditaria. Finalmente, con la aportación de Watson y Crick en el año de 1953 sobre la estructura molecular del ADN se abrió por completo una nueva rama de estudio para el entendimiento de los seres vivo a nivel molecular.

Existen dos clases de ácidos nucleicos presentes en todo organismo vivo: ácido ribonucleico (RNA) y ácido desoxirribonucleico (DNA). Entre las funciones biológicas de los ácidos nucleicos cabe mencionar el almacenamiento, la replicación, la recombinación y transmisión de información genética, por lo que se dice que un ácido nucleico determina lo que es y lo que hace cada célula viva.

El RNA y el DNA son polímero integrados por unidades monoméricas llamadas nucleótidos, por lo que es común que se les denomine polinucleotidos. Cada nucleótido está formado por tres partes químicas: fosfato inorgánico(P), un azúcar sencillo (S) y una purina o una pirimidina también conocidas como bases nitrogenadas (B) en la estructura de los nucleótidos las tres partes están unidas en orden fosfato-azúcar-base, o (P-S-B).

OBJETIVOS

• Extraer ADN de origen vegetal por métodos convencionales en el hogar.
• Aislar y observar ADN de origen vegetal.
• Determinar la absorbancia experimental de extractos vegetales de DNA y su concentración.
• Realizar la cromatografía en capa fina de las bases nitrogenadas y DNA hidrolizado y comparar lo obtenido

-Anota los 5 puntos que tienen en general las técnicas de obtención del DNA:

1.Se llevan a cabo a pH alcalino (pH= 8.5)

2.Se lleva a cabo una desproteinización

3.Inhibición de nucleasas, especialmente Dnasas

4. Lisis celular

5. Precipitación con algún alcohol

-Que función tiene el Tris-EDTA-NaCl:

*Mantener el pH a 8.5 y evitar que las células se lisen.

-Que es el SDS y para que se utiliza:

*Es un detergente aniónico que actúa como agente solubilizante de proteínas y de componentes de tejidos y membranas.

-Que función tiene la mezcla de cloroformo-alcohol isoamílico:

*Disminuir la constante dieléctrica para eliminar histonas

-A que longitud de onda se observa la máxima absorción para el DNA:

*A 260 nm

-A que longitud de onda se observa la máxima absorción para proteínas:

*A 280 nm

RESULTADOS

Tabla 1. Resultados obtenidos experimentalmente

[pic 3]

Gráfico 1. Absorbancia vs Longitud de onda de resultados experimentales de espinaca.

[pic 4]

Gráfico 2. Absorbancia vs Longitud de onda de resultados experimentales de guayaba

Tabla 2. Resultados obtenidos de la presentación

[pic 5]

Gráfico 3. Absorbancia vs Longitud de onda de resultados de la presentación de espinaca

...