Extracción de Alicina en Ajo y su Cuantificación por HPLC

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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NAYARIT

ANALISIS CROMATOGRAFICO Y DE MASAS

“Extracción de Alicina en Ajo y su Cuantificación por HPLC”

Integrantes:

Arredondo Sanchez Brandon Israel

Morales Jauregui Aldo Jordán

Fecha: 03/Junio/2019

1- Introducción

El aumento del interés por la aplicación de sustancias que puedan tener 2 finalidades como las de apoyar en el lado farmacéutico requerido, así como en la parte nutritiva, pero que se obtenga de manera natural, lo que implica un arduo estudio y caracterización de muchos componentes activos de plantas, usualmente para esto se estudia los principales componentes de los remedios naturales más usados.

fuera de los metabolitos primarios, las plantas crean muchísimos compuestos llamados fitoquimicos o metabolitos secundarios. aunque en muchos casos no se conoce con certeza la verdadera función de estos compuestos en las plantas; su actividad biológica en los animales es tradicionalmente muy conocida.

en este caso uno de los cuales se les presta más interés es el ajo, por todas las cualidades que se le atribuyen de prevención y tratamiento de gran cantidad de enfermedades, desde épocas muy antiguas. Entre los compuestos del ajo, se le presta atención a la alicina la cual ha ocupado el lugar más destacado por creerse que es la sustancia con mayor actividad biológica.

La alicina (S-2-propenil éster del ácido 2-propenol-1sulfinotiotico) representa típicamente el 70% de los compuestos sulfurados presentes en ajo fresco, siendo así el tiosulfinato de mayor abundancia en la planta.   Este es un compuesto que se forma a través de la interacción de su precursor (aliina) con la enzima aliinasa.  

 La aliina constituye el 0.24 % del peso global de la parte comestible del vegetal, se encuentra confinado en las vacuolas celulares y es el componente "madre" (farmacológicamente inactivo e inodoro) del cual se deriva la sustancia activa. La enzima aliinasa se encuentra en el citoplasma, de manera que el sustrato sólo tiene acceso a los precursores cuando se rompe el tejido (al ser machacado o cortado) provocando la formación de alicina acompañada del olor característico del ajo.

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La alicina es un compuesto altamente volátil que una vez formado sufre una rápida descomposición hacia compuestos sulfurados, los cuales no poseen actividad biológica de interés farmacológico. Debido a la elevada inestabilidad de este metabolito es necesario el control de varios factores para realizar una extracción eficiente y su posterior cuantificación.

La alicina en alcoholes, como el metanol produce trisulfuros de dialilo (83%) y disulfuros de dialilo (10%), ajoeno (1%) y vinil-ditiinas (1%), y un 5 % de compuestos no identificados. en el caso del etanol, produce trisulfuro de dialilo (73%) y algunos disulfuros de dialilo (8%) y ajoeno (8%) principalmente. sin embargo, al usar alicina pura se obtiene ajoeno (55%), vivil-ditiinas (34%) y algunos sulfuros (11%) entre los tiosulfinatos se tienen disulfuros y trisulfuros.

La vida promedio de la alicina a temperatura ambiente, en 1 mM de acido citrico con un pH 3 es de 10 dias, 4 dias en agua, 30HRS en diclorometano, 48Hrs en metanol o cloroformo, 24 horas en etanol o acetonitrilo, 3 horas en éter, 2 horas en hexano, y 16 horas en la ausencia de solventes.

A pesar de existir reportados varios métodos para la extracción y determinación de alicina en ajo fresco y extractos, no existe un consenso entre dichas metodologías, de manera que, dependiendo del método elegido, la concentración de alicina evaluada en una muestra puede presentar variaciones importantes.

Adicionalmente, debido a los numerosos reportes donde se ha demostrado la actividad biológica de alicina, y a la cada vez mayor demanda del consumidor por los productos elaborados a base de principios naturales, se ha observado un notable incremento en la aparición en el mercado de nuevos productos que dicen contener alicina. De manera que resulta necesario contar con una técnica de análisis estandarizada que permita un control de los productos comercializados.

 para iniciar los estudios de estos compuestos se debe pensar en cada aspecto del estudio desde lo que abarca el ambiente hasta los procesos por los cuales se hara la extracción para su estudio, recordando que sea hecho énfasis en la delicadeza de estos compuestos, un proceso extractivo, debe definir la selectividad del solvente a ser usado en el proceso. dependiendo del propósito al que se destine, se puede obtener un extracto cuya composición química contiene la mayor parte de los constituyentes de la planta, o un extracto que contiene solamente constituyentes químicos con una determinada característica.

para el primer caso, normalmente se usa un solvente de naturaleza general, de alta polaridad. en el segundo se emplea un solvente selectivo, de menor polaridad. en el segundo se emplea solvente selectivo, de menor polaridad.

se debe pensar en que estos son solo guía de como se hace una extracción, sin embargo, cuenta mucho la metodología con la que lo hagan y pensar siempre en mantener la integridad de la sustancia que se quiere aislar en este caso la alicina.

2- Justificación.

 Los compuestos sulfurados presentes en el ajo (Allium sativum L.), en especial la alicina, poseen diversas propiedades nutracéuticas benéficas para la salud. Sin embargo, la mayor parte de estos compuestos son altamente inestables y termosensibles, lo que dificulta el estudio de sus propiedades.

Sobre la base de estos antecedentes, se considera que la optimización de un método rápido y eficiente (minimizando las pérdidas y la degradación) para la extracción de los principales compuestos activos será de gran utilidad para permitir la diversificación del uso de este recurso natural renovable.

Los diferentes componentes extraídos serán caracterizados y/o identificados para su posterior aislamiento.

Uno de los principales puntos para darle base a la investigación y sobre el análisis de la molécula de alicina es que por el hecho de diversas técnicas de extracción al momento de la cuantificación se encuentra la problemática de que se encuentra una variación significativa y para poder eliminar este problema se encontró el método de HPLC acoplado a TOF para una mejor y más exacta cuantificación de la molécula.

Otro de los puntos importantes de la investigación es poder aplicar y entender los conceptos básicos de la cromatografía y poderlos aplicar de manera correcta y efectiva para la identificación, extracción y cuantificación de una molécula como de la cual hablaremos posteriormente.

3-Objetivo general:

demostrar la necesidad de que se genere una metodología eficaz para la extracción del compuesto natural alicina, mediante la cual se facilite su uso para hacer una caracterización más objetiva de sus propiedades nutraceúticas que tiene dicho compuesto.

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