Lab. Biologia General - Practica Difusion introduccion

PRÁCTICA CÉLULAS ANIMALES Y VEGETALES [pic 1]

Kevin Montoya Bermúdez, Alejandro Correa Moncada,
Juan David Paredes Valencia, Geraldine Palacio Monsalve

RESUMEN

INTRODUCCIÓN

El objetivo de esta práctica es reconocer la difusión como el paso de una sustancia desde un medio donde está más concentrada hacia otro medio donde está menos concentrada, como también los fenómenos que la afectan, tales como determinar temperatura a partir de la velocidad de una difusión y a través de membranas, es decir, diálisis y osmosis.

Además de observar si la célula se encuentra hipertónica, hipotónica o isotónica.

MATERIALES Y MÈTODOS

MATERIALES 

-Microscopio Compuesto Binocular

-Portaobjetos

-Cubreobjetos

-Goteros

-Frascos pequeños con agua

-Toallas de papel absorbente

-Parilla Eléctrica

-Cajas de Petri

-Tubos de ensayo

-Pipetas de 10 ml

-Celofán

-Hilo

-Elodea

-Agua destilada

-Lugol al 1%

-Azul de metileno al 1%

-Reactivo de Benedict

-Nitrato de plata al 0,1%

-Almidón soluble al 10%

-Glucosa al 10%

-Mezcla de almidón soluble al 10%, glucosa al 10% y cloruro de sodio al 10%

-Cloruro de calcio

MÉTODOS

Efecto de la temperatura en la velocidad de difusión

En dos cajas de Petri limpias y de igual volumen se adicionaron 30 ml de agua caliente en una y 30 ml de agua fría en la otra, luego se descargan las cajas sobre una hoja blanca y se adiciona una gota de azul de metileno en el centro de la superficie de cada caja simultáneamente y desde la misma altura (aproximadamente medio centímetro); se deja en reposo durante 5 minutos y luego se realizan las respectivas observaciones.

Difusión a través de membrana

Diálisis en membranas de celofán

Se remoja el celofán para separar sus paredes, luego amarre con hilo o pita uno de los extremos, se realiza una mezcla de cloruro de sodio, glucosa y almidón en un recipiente, luego de agitar la solución se extrae 20 ml, se echan en la bolsa de celofán, se amarra el otro extremo y luego este es lavado con agua para eliminar cualquier impureza que pueda afectar los resultados; se coloca en un beaker de 250 ml, se agrega agua destilada hasta cubrir la bolsa y se deja en reposo durante 20 minutos.

Reconocimiento de sustancias:

Almidón: en dos tubos de ensayo, en uno de ellos se echa 2 ml de la solución de almidón y en el otro 2 ml de agua destilada, se adicionan a cada uno dos gotas de lugol. Luego agite los tubos y describa los resultados.

Glucosa: en dos tubos de ensayo, uno de ellos con 2 ml de la solución de glucosa y el otro con 2 ml de agua destilada, se adicionan 5 gotas de reactivo de Benedict a cada uno, agite y ponga al baño maria de 3 a 5 minutos, luego se describen los resultados obtenidos.

Cloruro de sodio: en dos tubos de ensayo, uno de ellos con 2 ml de la solución de cloruro de sodio y el otro dos ml de agua destilada, se adiciona 3 o 4 gotas de nitrato de plata a cada uno. Luego agite los tubos y describen los resultados.

Después de pasados los 20 minutos (beaker con bolsa de celofán), en tres tubos de ensayo se adicionan 2 ml de agua del beaker. [pic 2]

Se adicionan a cada tubo el respectivo reactivo para cada sustancia, almidón (lugol), glucosa (reactivo benedict), cloruro de sodio (nitrato de plata), se agitan los recipientes.

Luego se realiza la observación y comparación entre tubos  teniendo en cuenta los recipientes correspondientes a cada sustancia y su contenido, de igual forma los colores respectivos que adquieren al estar en presencia o no las sustancias en el medio.

Osmosis en células de elodea:

Antes de realizar las observaciones se debe revisar las condiciones iniciales del microscopio y si tiene alguna anomalía registrada en la bitácora de uso para evitar posteriores inconvenientes en las observaciones y análisis.

Se realizan cuatro montajes en fresco con hojas de elodea de diferentes medios (natural, cloruro de calcio al 10%, cloruro de sodio al 10%, agua destilada) usando también una gota de agua del medio que se extrae la hoja, luego de tener las muestras se realizan las respectivas observaciones en el microscopio con los objetivos de 4x, 10x y 40x; luego de realizar y registrar las observaciones de cada muestra se define en qué tipo de medio se encuentra cada una (hipertónico, hipotónico, isotónico). [pic 3]

Luego de finalizar todos los análisis y procedimientos se procede a limpiar la vidriería y los sitios de trabajo, de igual forma la debida disposición de los residuos generados durante la práctica y por último el  correcto almacenamiento del microscopio.

RESULTADOS

Efecto de la temperatura en la velocidad de difusión

En este efecto, la caja de petril que tenía agua caliente ya que a medida que la temperatura aumenta, el proceso de difusión ocurre de forma más eficaz y se las moléculas se extienden más rápido.

(Figura 1 cajas de petril en temperaturas distintas)

Difusión a través de membranas

DIÁLISIS EN MEMBRANAS DE CELOFÁN

Al realizar el montaje del celofán (20ml de la mezcla) el en beaker con 250 ml de agua destilada y dejar el montaje en 20 minutos en reposo, podemos dar la conclusión que esta agua destilada, pasará a ser una mezcla, ya que el cloruro de sodio, la glucosa y el almidon se filtraran por la membrana permeable

. 

(Figura 2 Diálisis en membrana de celofán)

Luego del reposo de 20 minutos se realiza el reconocimiento.

ALMIDON

Tomamos dos tubos de ensayo y los titulamos

T1- 2ml de solución de almidón.

T2- 2ml de agua destilada.

+2 gotas de Lugol

Se obtiene una coloración morada, negra de T1, a diferencia de T2, coloración mucho más clara de color amarillo.

[pic 4]

(Figura 3, tubos de ensayo almidón)

GLUCOSA

Tomamos dos tubos de ensayo y los titulamos

T1- 2ml solución glucosa

T2- 2ml de agua destilada

+2-3 gotas de Reactivo de Benedict

+Baño de maría 5 minutos.

Se obtiene una coloración del T1 azul a diferencia del T2, su coloración es naranja.

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