Resumen - Técnicas Histologicas.

Técnicas histológicas

1. Toma de muestra: se debe obtener la muestra de forma sutil, rápida y sin traumar el tejido. En este caso será una biopsia pleural de un ratón.

2. Fijación: Tomar porciones de muestras pequeñas. Se fijan con Formalina o fijador de Zenker y éstas toman otro color. Es una forma de preservar la célula de las muestras.

3. Deshidratación: en esta etapa se debe eliminar el agua de las células con alcohol y acetona. Esto es ya que no se puede cortar la muestra con agua. Se eliminan los fijadores pasándola 30 min por cada alcohol de forma ascendente en sus grados para posteriormente sumergir en Metil Benzoato hasta que flote.

4. Inclusión: para obtener un bloque de tejidos y muestras se sumerge la muestra en parafina de condiciones fluidas y luego en parafinas de fluidez creciente durante 8 horas. Finalmente pasa por parafina limpia para obtener el bloque de inclusión o Taco mediante unas placas especiales llamadas Placas de Lucker. Se deja enfriar. El bloque de infusión (congelada y sostenida la muestra) se adhiere a un bloque de madera. Se lleva al micrótomo para realizar cortes muy finos en el tejido (se puede determinar el grosor de cada uno de ellos) y se obtiene una secuencia los que se deben separar.

5. Montaje: se ponen sobre un portaobjeto con albúmina diseminada para adherir la muestra y agua para facilitar su estiramiento (hidratación).

6. Tinción: Se tratan los portaobjetos con baños de Xilol para eliminar sustancias en las que la tinción no funcionaría. Se realiza una inmersión de baños rápidos de la muestra en alcoholes con grados decrecientes y finalmente en agua. Se tiñe con hematoxilina en un baño de 5 min, se eliminan excesos con agua común y se dan baños rápidos en eosina por 1 minuto, posteriormente en agua para eliminar excesos. Después se dan baños rápidos en alcoholes de grados crecientes y en baños de Xilol.

7. Montaje final: se limpia el resto de la muestra y para conservarlo se pone un cubre objeto y se sella con bálsamo de Canadá.

Finalmente es posible ver y llevar al microscopio.

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