TECNICAS HISTOLOGICAS.

Histología. Clase del 28/09/2016.

Desgravado por Brayan R. Fernández Osorio.

TEMA 1: TÉCNICA HISTOLÓGICA

Estudia desde la Célula (pequeña estructura) y todas sus características distintas, que pasarán a unirse para formar tejidos (ejm tejido óseo), que luego formarán órganos y sistemas (ejm el sistema esquelético). El estudio de las mismas se realiza a través de aparatos llamados microscopios.

Existen varias técnicas histológicas distintas que se utilizan para obtener PREPARADOS HISTOLÓGICOS

(El microscopio que se usará normalmente en clases es el MICROSCOPIO OPTICO DE LUZ CLARA)

TECNICA HISTOLOGICA

son todas aquellas técnicas que van a ser empleadas para realizar los preparados histológicos que van a ser empleados y analizados por los diferentes tipos de microscopio. Son todas las técnicas o proceos a los que son sometidos los tejidos cuando son extraídos del ser humano para que puedan ser observados y analizados en el microscopio. Varían de acuerdo al tipo de microscopio y al tipo de tejido al cual se vaya a analizar (NO es lo mismo analizar en el microscopio un tejido blando(piel, mucosa bucal) a analizar tejidos duros (tejido óseo, algunos órganos dentales que poseen parte de tejidos duros).

¿Qué es un Microscopio?

Es un instrumento óptico formado por un sistema de lentes, es decir, permite ver una imagen ampliada para la observación de objetos muy pequeños por el ojo humano (EJEMPLO: A SIMPLE VISTA NO PODEMOS OBSERVAR UNA CÉLULA, SI DETALLAMOS A UNA PERSONA NO PODEMOS VER LAS CÉLULAS QUE LA CONFORMAN). El microscopio va a permitir que ese tejido de piel que preparemos se pueda observar aumentada la imagen.

Hay diferentes tipos aunque todos conservan el mismo principio de amplificar imágenes muy pequeñas.

Se dividen en dos tipos de acuerdo al sistema a través del cual funcionan:

1. Microscopio ópticos (funcionan con LUZ)
2. Microscopios electrónicos (funcionan con electrones) utilizados para investigaciones y en algunos casos en Patología Bucal para el reconocimiento de algunas lesiones específicas.

1. Microscopios ópticos:

1. Microscopio óptico de luz clara: (el utilizado en el laboratorio de histología)
2. Microscopio de campo oscuro
3. Microscopio de contraste de fases
4. Microscopio de interferencia de luz polarizada
5. Microscopio de barrido confocal
6. Microscopio de luz ultravioleta

1. Microscopios electrónicos:

1. Microscopio electrónico de transmisión
2. Microscopio electrónico de barrido

MICROSCOPIO ÓPTICO DE LUZ CLARA

[pic 1]

Fundamentos:

Este sistema posee un bombillo o lámpara de luz clara que a través del sistema de lentes permiten que la luz se proyecte sobre la muestra y esa imagen sea amplificada a través de un conjunto de lentes (ocular, objetivo, etc)que nos permiten aumentar grosso modo la imagen de lo que estamos viendo, y además permiten que se vea nítidament.

• EJEMPLO: ¿QUÉ PASA CUANDO A UNA FOTOGRAFÍA LE DAMOS A AUMENTAR O LE DAMOS ZOOM? -SE PIXELA, SE VE BORROSA, PIERDE NITIDEZ. LO MISMO PASA CON UN MICROSCOPIO ÓPTICO, CUANDO AUMENTAMOS LA IMAGEN, SI EL MICROSCOPIO NO TIENE EL CONJUNTO DE LENTES ADECUADOS TENDREMOS UNA IMAGEN MUY GRANDE PERO BORROSA.

A través de unos tornillos el microscopio no solo tiene la capacidad de aumentar la imagen sino también de aumentar la resolución de la imagen.

La capacidad del ojo humano para aumentar la imagen es de aprox 2mm, mientras que la del microscopio óptico es de 2 unanómetros.

Elementos del microscopio que nos van a permitir aumentar la imagen:

(aumento: relación del tamaño de la imagen y del objeto en valores lineales, es decir, es la relación que existe entre la imagen que estamos viendo y el tamaño real de la célula o del tejido que estamos viendo)

La imagen se aumenta gracias a un sistema de lentes:

1. Lente Ocular
2. Lentes Objetivos

Los Lentes Objetivos varían de tamaño de acuerdo a su capacidad de aumentar la imagen.

Los  objetivos están sobre una estructura que se llama revolver, el cual gira para permitir utilizar un objetivo u otro dependiendo de cuán grande quiero ampliar la imagen o no. El microscopio que usaremos en la cátedra posee sólo 3 obejitvos, aunque en general los grandes microscopios tienen 4 objetivos. Cada uno posee una capacidad de aumento distinto:

• Un objetivo de 4x
• Un objetivo de 10x
• Un objetivo de 40x
• 1 objetivo de 100x (en este objetivo es NECESARIO utilizar ACEITE DE INMERSIÓN para que el objetivo pueda moverse dentro de la muestra, porque como el objetivo es tan grande y está tan pegado a la lámina, si no utilizamos el aceite corremos el riesgo de que rompa la muestra debido a su cercanía) (Este objetivo casi no lo usaremos, en práctica normalmente usaremos el 4x y el 10x)

¿QUÉ SIGNIFICA 4, 10, 40, 100? Que ese objetivo aumenta 4 veces el tamaño de la imagen, o 10 veces el tamaño real de esa imagen… por eso el aumento es directamente proporcional entre el tamaño de la imagen y el tamaño real del objeto.

Lente Ocular: es donde vamos a colocar los ojos para observar directamente esa imagen que ha ampliado el lente objetivo (los que vamos a utilizar en la cátedra poseen 2 oculares). Este lente también tiene cierto grado de aumento, el cual es aproximadamente de 10x, lo que quiere decir que cuando se coloca una muestra a 4x sería en realidad 4x10=40 veces el tamaño real de la imagen. Si lo coloco a 10x lo estoy aumentando realmente a 100x, a 40x sería a 400x y a 100x sería a 1000x.

Poder de resolución (nitidez): es la distancia mínima que debe existir entre dos puntos de un objeto para que se visualicen separados. Ejemplo: y colocamos a una persona detrás de otra no podemos distinguir que en realidad están separadas, en cambio si se comienza a separar poco a poco si lo haremos. Entonces la resolución va a ser la distancia mínima necesaria para ver a esas dos personas separadas. Esto nos va a ayudar a observar una imagen como realmente es, por eso es muy importante no solamente el aumento sino la resolución.

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