Tecnica Histologica

Técnica histológica

Se denomina técnica histológica al conjunto de operaciones a que se somete una materia organizada, a fin de que sea posible su estudio por medio del microscopio, posibilitando la observación de estructuras no visibles al ojo humano.

Pasos de la Técnica histológicaObtención del material histológico para estudiar

Proceso de fijación

Lavados

Deshidratación

Aclaramiento

Infiltración

Inclusión

Microtomía

Tinción

Observación (Este último no es considerado como un paso de la técnica histologica por varios autores)

Obtención del material histológicoLos tejidos se pueden obtener de diferentes formas:

Biopsia

Abiopsia

Necropsia (llamada vulgarmente autopsia)

FijaciónEn este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar los cambios post-mortem Unos de los fijadores más usado es el Formol al 10% (Formaldehido). En el caso de que utilicemos más adelante el microscopio electrónico, usaremos glutaraldehido (proteínas) u osmio (lípidos).

LavadosSe debe lavar el tejido para quitar exceso de fijador

DeshidrataciónSuena incoherente que se deba lavar el tejido y después deshidratarlo. El exceso de fijador al momento de la infiltración, incluso en la microtomia, podría afectar los cortes, por eso se debe lavar. La deshidratación se hace con el uso de alcohol de una menor concentración a una mayor.

AclaramientoEn este paso el se sustituye el alcohol por un disolvente de parafina lo más usado es el Xilol (Xileno) ya que como esta deshidratado el xilol entrará hasta lo más profundo del tejido. También el tejido pierde color hasta un tono acaramelado.

InfiltraciónEn este paso la muestra se coloca en parafina liquida, cabe mencionar que se debe usar parafina histológica, como se ha dicho en el paso anterior el tejido esta completamente lleno de xilol, ahora debido a osmosis sale el xilol y entra la parafina.

La deshidratación, Aclaramiento e Infiltración se pueden realizar manualmente pero hoy en día existe una máquina que lo puede realizar.

InclusiónAquí se forman bloques de parafina y dentro de estos bloques están las muestras a estudiar. hay maquinas especializadas para la inclusión en parafina de tejidos. Después que se incluyeron los bloques y por conseunte se dejaron secar, estos se deben poner a enfriar en un congelador para su posterior corte.

MicrotomiaSe realizan cortes muy delgados que van de acuerdo a lo requerido o costumbre del laboratorio donde se realice la técnica, los cortes van desde .5 micras hasta 8 u 10 micras. Los cortes se echan al baño de flotacion y se ´pescan´ con un portaobjetos, se marca con la fecha, el tejido que es y con que tincion se va a procesar. El ángulo

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