Tecnicas Histologicas

Definición

Se denomina Técnicas Histológicas al conjunto de operaciones que se somete un tejido biológico a fin de que posible su estudio por medio del microscopio, dando la posibilidad de observar estructuras no visibles al ojo humano.

Pasos de la Técnica Histológica

 Obtención del material histológico

 Proceso de fijación

 Lavados

 Deshidratación

 Aclaramiento

 Bloqueamiento

 Micrótomo

 Tinción

 Observación

Obtención del material histológico

Los tejidos se pueden obtener de distintas maneras:

• Biopsia: endoscópica, colposcopica, punción aspiración.

• Autopsia

Fijación

En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para lograr conservar la forma original. Unos de los fijadores más usados es el formol al 10%.

Lavados

Se debe lavar el tejido para quitar el exceso de fijador.

Deshidratación

El exceso de fijador al momento del Bloqueamiento puede afectar los cortes histológicos y por ello se debe lavar. La deshidratación se hace empleando diferentes soluciones de alcohol de concentración creciente.

Aclaramiento

En este paso se sustituye el alcohol por un disolvente de parafina, el mas usado es el Xilol ya que como la muestra está deshidratada, el xilol entrará hasta lo más profundo del tejido. También el tejido pierde color y adquiere un tono acaramelado.

Bloqueamiento

Tiene como finalidad proporcionarle al tejido un soporte solido que posibilite realizar cotes muy finos, por lo que es de suma importancia que el medio utilizado para la inclusión penetre al interior del tejido. Aquí se forman bloques de parafina dentro de los cuales están las muestras a estudiar. También hay máquinas especializadas para la inclusión en parafina de tejidos. Después de su inclusión y posterior secado, estos se deben poner a enfriar en un congelador para su posterior corte. Puede llevarse a cabo en Parafina.

Micrótomo

Se realizan cortes histológicos muy delgados según lo requerido del laboratorio donde se realiza la técnica.

Los cortes van desde 0,5 micras hasta 8 u 10 micras.

Los cortes se echan al baño de flotación y se ´pescan ´ con un portaobjetos, se marcan con la fecha, el tipo de tejido y la tinción con que se van a procesar.

El ángulo de corte entre el cuchillo del micrótomo y el bloque ha de estar entre 10º y 15º.

Una vez realizado el corte se da un baño de agua destilada, para que la parafina se estire.

Un buen corte histológico debe tener un grosor aproximado de 3-5 micras para que sea fácilmente

...