VITAMINA C (ÁCIDO ASCÓRBICO) EN PREPARACIONES VITAMÍNICAS Y JUGOS

VITAMINA C (ÁCIDO ASCÓRBICO) EN PREPARACIONES VITAMÍNICAS Y JUGOS

Método 967.21 (AOAC, 1990) p. 1058,  Método por titulación de 2,6-dicloroindofenol

1. Principio.

El ácido ascórbico reduce el colorante indicador 2,6-dicloroindofenol  por óxido-reducción, a una solución incolora. En el punto final, un exceso de colorante no reducido es rosa en solución ácida. La vitamina se extrae y se realiza una titulación en presencia de solución de HPO3-HOAc o HPO3-HOAc-H2SO4 para mantener la acidez apropiada para la reacción y evitar la auto-oxidación del ácido ascórbico a pH altos.

(La cantidad de vitamina C se determina por una titulación redox usando la reacción entre el ácido ascórbico y el 2-6 dicloroindofenol (DCIP). El DCIP se utiliza como titulante porque actúa como un indicador en la titulación y porque oxida solo el ácido ascórbico y no otras sustancias presentes.

En solución ácida el DCIP  es rojo, pero si el ácido  ascórbico está presente, éste se reduce a una sustancia incolora. La solución permanecerá incolora hasta que todo el ácido ascórbico haya reaccionado. Tan pronto como la siguiente gota de DCIP se añada a la solución, ésta se volverá roja debido al exceso de DCIP y el punto final de la titulación  se alcanza.)

1. Material.

2 Matraz volumétrico 200 mL

1 Matraz volumétrico 100 mL

2 Matraz aforado de 25 mL

2 Vaso de precipitado 200 mL

15 Matraz Erlenmeyer 50 mL

1 Bureta 50 mL

2 Pipeta volumétrica 5 mL

1 Pipeta volumétrica 2 mL

1 Pipeta 10 mL

1 Embudo de filtración de vidrio

1 Soporte universal

1 Anillo metálico

1 Parrilla de agitación

1 Agitador magnético

1 Espátula

2 Papel filtro poro medio

1 Succionador

1 Pinzas para bureta

1 Frasco para almacenar el indofenol (ámbar)

1 Frasco para almacenar HPO3/Ac. Acético

1. Reactivos.

1. Soluciones de extracción.

(1) Solución de ácido metafosfórico-ácido acético (HPO3-HOAc).

Disolver con agitación 15 g de pellets de HPO3 en 40 ml de HOAc y 200 ml de agua, aforar a 500 ml y filtrar rápidamente a través de papel filtro estriado en una botella con tapón de vidrio. (HPO3 cambia lentamente a H3PO4, pero si se almacena en refrigeración la solución se mantiene estable  por 7 o 10 días).

(2) Solución de ácido metafosfórico-ácido acético-ácido sulfúrico.  Se procede al igual que en (1) solo que en lugar de usar agua, se usa H2SO4 0.3N.

1. Solución estándar de ácido ascórbico. 1mg/ml. Pesar 50 mg de estándar de ácido ascórbico USP, que se mantiene almacenado en desecador, alejado de la luz directa, transferir a un matraz volumétrico de 50 ml. Aforar INMEDIATAMENTE ANTES DE USARSE, con la solución  de HPO3-HOAc  (a)(1).     (Nota: preparar solo 25 mL)
2. Solución estándar de indofenol. Disolver 50 mg de la sal de sodio de 2,6-dicloroindofenol (Eastman Kodak Co. No. 3463) previamente almacenada en desecador sobre cal sodada, en 50 ml de H2O a la cual se le agregó  42 mg de NaHCO3; agitar vigorosamente, y cuando el colorante se disuelva, aforar a 200 ml con H2O. Filtrar a través de papel estriado, en un frasco ámbar con tapón de vidrio.  Mantener tapada la botella, alejada del contacto directo con luz solar y almacenar en refrigerador.

(Los productos de descomposición que causan un punto final indistinto, se dan en algunos lotes de indofenol seco, y también se desarrollan en algunas soluciones stock con el tiempo.  Agregue 5 ml de solución de extracción conteniendo un exceso de ácido ascórbico a 15 ml del reactivo colorante. Si la solución reducida no es prácticamente incolora, deséchela y prepare nueva solución stock. Si el reactivo colorante es el factor, obtenga un nuevo producto.)

Transferir tres alícuotas de 2 ml de solución estándar de ácido ascórbico a cada uno de 3 matraces erlenmeyer de 50 ml que contengan 5ml de solución HPO3-HOAc (a)(1).

Titular rápidamente con la solución de indofenol desde una bureta de 50 ml, hasta que persista un tono rosa claro por 5 seg. (Cada titulación debería requerir alrededor de 15 ml de solución de indofenol, y las titulaciones deberían diferir como máximo 0.1 ml).

Titule de manera similar 3 blancos compuestos de 7 ml de solución HPO3-HOAc (a) (1), más un volumen de H2O equivalente al volumen de indofenol usado en las titulaciones directas. Después de restar el promedio de blancos (usualmente alrededor de 0.1 ml) de las titulaciones estandarizadas, calcular y expresar la concentración de solución de indofenol como miligramos de ácido ascórbico equivalentes  a  1 ml de reactivo. 

Estandarizar la solución de indofenol diariamente con solución estándar de ácido ascórbico recientemente preparada.

Cálculos:

 Título =(A/B) = mg de vit C/ml de la solución = F

Donde:

 A= mg de vit. C contenidos en la alícuota

B= ml de la solución de la sal sódica del 2,6-diclorofenol-indofenol empleados en la titulación.

Ejemplo:

*El título es el peso de una sustancia analizada que equivale químicamente a 1 ml del titulante y suele expresarse en miligramos.

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