Pruebas Bioquimicas

Prueba bioquímica PROPOSITO COMO SE REALIZA INTERPRETACION IMAGEN

Vogues Poskauer

Determinar la capacidad de algunos microorganismos para producir un producto final neutro, acetoina a partir de la fermentación de glucosa. A 1ml de cultivo se le añaden 12 gotas (de 0.6ml) de a-naftol al 5% en etanol y 4 gotas (de o.2ml) de KOH al 40%, agitar con la asa en el tubo y dejar reposar durante 5 a 10 min.

*Positiva: color rosa por la presencia de acetoina, producto de la fermentación de glucosa.

*Negativo: marrón claro, no cambia el medio.

Rojo de metilo

Determinar la capacidad de un microorganismo para producir y mantener estables los productos finales acidos a partir de la fermentación de la glucosa y para vencer la capacidad de buffer del sistema.

Se transfieren 5ml del cultivo y se le añaden 5 gotas de solución indicadora rojo de metilo.

*Positiva: color rojo debido a la presencia de ácidos provenientes de la fermentación de la glucosa.

*Negativo: color amarillo debido a que no hay producción de acido

Kliger

Determinar la capacidad de las bacterias para atacar un carbohidrato (fermentación de glucosa y lactosa) de forma anaerobia y aerobia y como consecuencia la producción de gas y acido.

Suspender 54.8g del polvo por litro de agua destilada, mezclar y calentar con agitación fuerte, hervir 1 o 2 min, hasta disolución total.

Se siembra por picadura y estría. *Glu + y lactosa -: reacción alcalina-acida

*Glu + y lactosa +: reacción acida- acida

*Glu - y lactosa - : reacción alcalina-alcalina.

*SH + : ennegrecimiento del medio

*SH – y gas - : no hay cambio de color

*Gas +: aparición de burbujas o ruptura.

Citrato de Simmons

Determinar si la bacteria utiliza citrato como única fuente de carbono.

El medio contiene citrato sódico, fosfato de amonio y azul de bromotimol como indicador.

Se siembra por picadura y estria.

*Positivo: color azul de Prusia, debido a que las bacterias metabolizan el citrato liberan iones amonio al medio y hace que se alcalinice.

*Negativo: color verde, el medio no cambia.

Urea

Determinar la capacidad de la bacteria para desdoblar la urea por la acción de la enzima ureasa formando un anhídrido carbónico mas amoniaco.

Suspender 3.87g del medio deshidratado por cada 100mp de agua destilada. Disolver sin calentar y esterilizar por filtración. Se siembra por agitación.

*Positivo: color rojo rosado, debido a que la bacteria degrada la urea por la enzima ureasa y forma amoniaco y carbonato amonio.

*Negativo: el medio queda igual (anaranjado)

LIA

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