Determinación cuantitativa de la riboflavina
Enviado por mermaid1182 • 13 de Septiembre de 2015 • Práctica o problema • 1.237 Palabras (5 Páginas) • 1.040 Visitas
INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
[pic 1]
Laboratorio de Métodos de análisis
“DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE RIBOFLAVINA POR FLUOROMETRÍ Y EFECTO DEL PH SOBRE LA INTENSIDAD DE FLUORESCENCIA”
- Nombre del alumno: Domínguez López Judit
- Grupo: 4IV1
- Sección: 3
- Prof. Rogelio Benítez Ibarra
- Fecha de elaboración: 22/Enero/2015
- Fecha de entrega: 29/Enero/2015
- Situación escolar: Inscrito
DETERMINACIÓ CUANTITATIVA DE LA RIBOFLAVINA POR FLUOROMETRÍA
RESULTADOS
Tabla 5. Resultados de la curva de calibración de la riboflavina en diferentes medios | ||||
Riboflavina (ppm) | Intensidad de fluorescencia en [pic 2] | Intensidad de fluorescencia en HCl 0.1 M | Intensidad de fluorescencia en 0.9 M[pic 3] | Intensidad de fluorescencia en NaOH 0.1 M |
0.0 | 4.90 | 4.93 | 4.94 | 4.93 |
1.0 | 8.99 | 5.08 | 5.93 | 4.94 |
2.0 | 12.12 | 5.22 | 6.92 | 4.95 |
3.0 | 14.92 | 5.36 | 7.73 | 4.96 |
4.0 | 15.96 | 5.49 | 8.49 | 4.96 |
5.0 | 16.90 | 5.59 | 9.11 | 4.97 |
10.0 | 18.89 | 6.08 | 12.06 | 4.99 |
50.0 | 8.93 | 6.90 | 16.40 | 5.05 |
pH | 5.5 | 1.0 | 3.0 | 13 |
[pic 5][pic 4]
[pic 7][pic 6]
Tabla 6. Resultados de la curva de calibración en diferentes medios sin el blanco de reactivo. | ||||
Riboflavina (ppm) | Intensidad de fluorescencia en ([pic 8][pic 9] | Intensidad de fluorescencia en HCl 0.1 M ([pic 10] | Intensidad de fluorescencia en 0.9 M ([pic 11][pic 12] | Intensidad de fluorescencia en NaOH 0.1 M [pic 13] |
0.0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
1.0 | 4.09 | 0.15 | 0.99 | 0.01 |
2.0 | 7.22 | 0.29 | 1.98 | 0.02 |
3.0 | 10.2 | 0.43 | 2.79 | 0.03 |
4.0 | 11.6 | 0.56 | 3.55 | 0.03 |
5.0 | 12 | 0.66 | 4.17 | 0.04 |
10.0 | 13.99 | 1.15 | 7.12 | 0.06 |
50.0 | 4.03 | 1.97 | 11.46 | 0.12 |
pH | 5.5 | 1.0 | 3.0 | 13 |
[pic 15][pic 14]
[pic 17][pic 16]
CUESTIONARIO
- ¿Por qué se deben conocer las longitudes de onda de máxima excitación y de máxima emisión?
Porqué para hacer una determinación cuantitativa de un compuesto por fluorescencia es necesario conocer las longitudes de onda de máxima excitación y máxima emisión, para así poder elaborar una curva de calibración representada por la intensidad de emisión contra la concentración del analito. Por interpolación con dicha curva se obtiene la concentración del compuesto usando el dato de su valor de emisión.
- Diga cuáles son las formas coenzimáticas de la riboflavina y cuál es su papel en el metabolismo celular.
La riboflavina tiene dos formas coenzimáticas: La flavina adenina dinucleótido (FAD) y la flavina mononucleótido (FMN), que son los grupos prostéticos de muchas enzimas (flavoproteínas o flavoenzimas) implicadas en el catabolismo oxidativo de piruvato, ácidos grasos, aminoácidos y en el mecanismo de transporte electrónico en la cadena respiratoria.
- ¿Por qué afecta al pH en la intensidad de fluorescencia?
La fluorescencia de un compuesto aromático con sustituyentes ácidos o básicos en el anillo depende normalmente del pH debido a las diferentes especies químicas resonantes que pueden existir en función de dicho factor.
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