Practica ADN

Observación.

En algunas ocasiones se presentan trisomías en el par 23 de nuestras células somáticas. Cuando esto ocurre, por lo regular son los cromosomas X los que se replican los cuales se inactivan, a lo que también se le reconoce como material extra cromosómico, se concentra y forma lo que se denomina Corpúsculo de Barr que se presenta en las células de las mujeres.

Pregunta.

¿Cómo podemos distinguir la cromatina sexual?

Delimitación del problema.

Por medio de un experimento en el laboratorio, se pretende identificar la cromatina sexual e identificar el sexo del individuo a través de esta.

Objetivo.

Por medio de un experimento en el laboratorio se utilizará sangre y epitelio bucal para identificar al microscopio la cromatina sexual.

Se aplicará diferentes métodos para elaborar laminillas en las que se identificara la cromatina sexual.

De esta manera se determinará citológicamente el sexo de un individuo mediante la observación de las laminillas histológicas procesadas previamente.

Marco teórico.

Célula. La célula es la unidad básica de la vida. De la misma forma en que el átomo es considerado la unidad básica de la materia, la célula es la unidad de estructura y función de todo ser.

Cromosoma. Un cromosoma es una estructura en la que el ADN está muy empaquetado y protegido. Los cromosomas son un componente celular que solo se forman cuando la célula está en división. Son los encargados de transportar el ADN (ácido desoxirribonucleico) y los genes durante la división celular.

Corpúsculo de Barr. Corpúsculo de Barr representa un cromosoma X inactivo el cual se enrolla de manera compacta, tomando la estructura conocida como heterocromatina, una forma condensada y por tanto visible de la cromatina.

Cromatina sexual

La cromatina sexual se deriva de un cromosoma “X” de origen materno o paterno, condensado precozmente durante el desarrollo embrionario femenino normal, de manera aleatoria en cada una de las células que componen a dicho embrión; a partir de ese las células hijas resultantes seguirán condensado el mismo cromosoma “X” de su progenitora.

En 1923, Painter demostró citológicamente la existencia de los cromosomas X y Y en el humano.

La cromatina sexual fue descubierta en 1944-45 por Smith en un lepidóptero, fueron Barr y Bertram (1949) los que llamaron la atención sobre la presencia en los núcleos de las neuronas de gata en la interface femenina y no en la masculina, al que llamaron satélite núcleo solar. En 1959 Ohno, Kaplan y Kinosita demostraron que la cromatina sexual corresponde a un solo cromosoma “X” condensado; en 1961 Mary Lyon propuso su hipótesis de lo cual los puntos más importantes son:

• El cromosoma “X” condensado en genéticamente inactivo.

• La primera inactivación del cromosoma “X” materno o paterno es el azar en una etapa de blastocito.

• Una vez establecida la inactivación el mismo cromosoma “X” (paterno o materno) seguirán inactivos en las células descendientes.

La cromatina sexual aparecía en un 50-60 de 100 por las células de las hembras, mientras que estaban prácticamente ausente en los machos. La cromatina sexual suele localizarse en la membrana nuclear y su tamaño máximo es de 1 μ, está compuesto por ADN ya que en l cromatina nuclear es diferente ya que contiene más ARN que ADN.

Hipótesis.

Si se utiliza un colorante químico que reacciona con el material genético sobre un portaobjetos que tenga un frotis bucal de una mujer, entonces el pigmento teñirá a los cromosomas y de este modo se podrá apreciar, con ayuda de un microscopio, la presencia de cromatina sexual o Corpúsculos de Barr presentes en la muestra.

Materiales.

Materiales:

• Portaobjetos

• Microscopio óptico

• Cajas petri

• Probetas de 25 ml

• Pipetas de 10 ml

• Abate lenguas

• Varilla de vidrio

• Papel seda

• Lancetas estériles

• Cámara de tinción

Material Biológico.

• Raspado de la mucosa bucal (células de descamación)

• Gotas de sangre obtenidas por punción capilar

Reactivos.

• Etanol al 96% y 70%

• Solución colorante Giemsa Diluido 1:10 (v/v)

• Solución de colorante de fucsina básica

• Solución colorante de Wright

• Etanol absoluto

• Xilol

• Aceite de inmersión

Procedimiento.

• Método de tinción de células epiteliales con Giemsa

• Enjuagar la boca repetidas veces con agua y raspar la mucosa interna de la mejilla con un abatelenguas, desechar este primer raspado por el alto contenido de bacterias.

• Repetir la operación y extender

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