TRABAJO PRÁCTICO DE LABORATORIO N°5 ANÁLISIS FISICO-QUIMICO DE MIEL

TRABAJO  PRÁCTICO  DE  LABORATORIO  N°5

ANÁLISIS FISICO-QUIMICO DE MIEL

OBJETIVOS:

• Adquirir destreza en la toma de muestras de miel.
• Adquirir destreza en la realización de las técnicas correspondientes.
• Adquirir destreza en la preparación de soluciones en las concentraciones necesarias.
• Adquirir destreza en la elaboración de informes.
• Interpretación de los resultados.

1. PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS

Si la muestra está libre de gránulos, mezclar perfectamente removiendo o agitando; si se tienen gránulos, meter el envase cerrado al baño María, sin sumergirlo y calentar durante treinta minutos a 50ºC hasta que la miel se licúe. Es esencial agitar de vez en cuando. Cuando lo que se desea determinar es el hidroximetilfurfural o la diastasa, no se debe calentar la miel. Si hay alguna sustancia extraña, calentar la muestra al baño María hasta 40ºC y filtrarla.

1. DETERMINACIÓN DE AZUCARES REDUCTORES

Método de Fehling Causse Bonans

Principio del método:

Es un método cuprovolumétrico de óxido-reducción. Está basado en la acción reductora de los monosacáridos sobre un oxidante que en este caso es el catión Cu++.

Para evitar la precipitación del cobre, se agrega tartrato de Na y K.

Material necesario:

• Probeta graduada de 50ml.
• Embudo.
• Erlenmeyer.
• Papel de filtro.
• Bureta acodada incolora de 25ml.
• Mechero.
• Pipeta de 15ml doble aforo.

Reactivos:

• Solución de acetato de plomo cristalizado 25%: pesar 25g de acetato de plomo cristalizado en un vaso de precipitados (conservar la tara en la balanza). Calentar sobre mechero hasta su total fusión, y luego, en caliente, llevar a la balanza y agregar agua destilada hasta completar 100g.
• Solución de azúcar invertido 5% (g / l): pesar con exactitud 4,750g de sacarosa pura, lavada con alcohol, y previamente desecada en estufa a 70°C, hasta peso constante: en un matraz aforado de 1000ml se colocan los 4,750g de sacarosa, se agregan unos 10ml de agua destilada y 5ml de ácido clorhídrico (densidad 1,19). Se deja en reposo durante 15 a 20 minutos, en baño maría a 70°C, o 3 días a 20-25°C, a fin de invertir la sacarosa.

Se neutraliza exactamente con NaOH, se enfría, se agregan 2g de fenol (para conservar) y se completa a 1000ml con agua destilada.

• Solución de azul de metileno 1%: disolver 1g de azul de metileno en un poco de agua. Se pasa cuantitativamente a un matraz aforado de 100ml, completando con agua destilada al volumen correspondiente.
• Reactivo de Fehling Causse Bonans: consta de 130g de tartrato doble de Na y K, 110g de hidróxido de Na puro, 24g de sulfato de Cu puro cristalizado, 16,80g de hexacianoferrato de potasio y 1000ml de agua destilada.

Se disuelven separadamente, y se mezclan en el orden indicado. Se completa el volumen a 1000ml trabajando con matraz aforado.

El NaOH debe agregarse en solución concentrada, en caso necesario se filtra con lana de vidrio.

Titulación del reactivo FCB

En un Erlenmeyer de 250ml de capacidad se colocan 15ml de reactivo y 50 ml de agua destilada y se calientan sobre tela metálica. Cuando el líquido comienza a hervir, se agrega por medio de una bureta acodada, la solución de azúcar invertido a razón de unas 3gotas por segundo, cuidando de mantener una franca ebullición. Cuando se está próximo al punto final, lo que se aprecia por la débil coloración verdosa que toma el líquido, se agregan 2 gotas de la solución de azul me metileno, y una vez que este se ha distribuido uniformemente, se continua la adición de azúcar a razón de 1 o 2 gotas por vez y con intervalos de unos segundos, hasta la desaparición de color azul.

El líquido debe quedar límpido y de color amarillo claro. Los 15ml de FCB deben ser reducidos exactamente por 8,2ml de la solución de azúcar invertido.

Si así no fuera, será necesario agregar agua o sulfato de cobre al reactivo hasta obtener un gasto de 8,2ml en dos ensayos consecutivos, que este resulte un poco más concentrado, pues siempre es más fácil la corrección por dilución.

Procedimiento:

Preparación de la muestra:

1. Mieles con sedimento: pesar al centigramo 25g de miel homogeneizada. Trasvasar a un matraz de 100ml, agregar 5 ml de crema de alúmina (o acetato de plomo al 25%) y llevar a volumen con agua. Filtrar con papel. Tomar 10 ml y diluir a 500ml (solución diluida al 0,5%).
2. Mieles sin sedimentos: pesar al miligramo 2g de miel homogeneizda. Disolver en agua destilada y diluir a 200ml (dilución 1%). Tomar 50ml y diluir a 100ml (dilución de miel al 0,5%). Seguir según la técnica especificada anteriormente.

Valoración de la muestra:

Colocar en un Erlenmeyer de 250ml de capacidad, 15 ml del reactivo Fehling Causse Bonans y 50ml de agua destilada. Se calienta sobre tela metálica.

Cuando comienza a hervir, se agrega por medio de una bureta acodada, la muestra preparada según la técnica anterior, a razón de 3 gotas por segundo, cuidando de mantener una franca ebullición. Cuando se encuentra cercano al punto final, lo que se aprecia por una leve coloración verdosa que toma el líquido, se agregan dos gotas de solución de azul de metileno, y una vez que este se ha distribuido uniformemente, se continua la adición de solución de azúcar a razón de 1 o 2 gotas por vez y con intervalos de unos segundos, hasta desaparición de color azul.

Cálculos:

[pic 3]

Ar =

Donde:

Ar: contenido de azucares reductores, en g % en peso.

Gm: peso de la muestra en g.

V: volumen de líquido azucarino defecado y filtrado empleado en la valoración (en ml).

1. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO APARENTE DE SACAROSA

Fundamento del método:

Se basa en el método de inversión de Walker.

Materiales necesarios:

• Matraz aforado de 100 y 250ml.
• Pipeta graduada de 10ml.
• Pipetas aforadas de 50ml.
• Baño de agua.
• Probeta de 25ml.

Reactivos necesarios:

• Solución de Fehling Causse Bonans.
• Solución patrón de azúcar invertido.
• Solución acuosa de ácido clorhídrico 6,34N: medir 132ml de ácido clorhídrico de d= 1,19, trasvasar a un matraz aforado de 250ml y diluir con agua destilada hasta completar el volumen.
• Solución acuosa de NaOH 5N: pesar 20g de NaOH, disolver en agua y diluir a 100ml.
• Solución acuosa de azul de metileno 2g / 1000ml.

Procedimiento:

Preparación de la muestra

1. Mieles con sedimento: pesar al centigramo 25g de miel homogeneizada. Trasvasar a un matraz de 100ml, agregar 5 ml de crema de alúmina (o acetato de plomo al 25%) y llevar a volumen con agua. Filtrar con papel. Tomar 10 ml y diluir a 500ml (solución diluida al 0,5%).
2. Mieles sin sedimentos: pesar al miligramo 2g de miel homogeneizda. Disolver en agua destilada y diluir a 200ml (dilución 1%). Tomar 50ml y diluir a 100ml (dilución de miel al 0,5%). Seguir según la técnica especificada anteriormente.

Para la determinación del contenido aparente de sacarosa, la muestra se prepara como se indico en la determinación de azucares reductores con la única diferencia que la dilución final es de 250ml para obtener la solución diluida de la miel.

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